摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1实验材料 1
1.1.1 仪器 1
1.1.2 试剂 1
1.1.3 菌种 2
1.1.4 PDA培养基 2
1.1.5 粗酶液的制备 2
1.1.6 等电聚焦酶谱分析 2
1.1.7 胶体溶液的配制 2
2实验方法 2
2.2.1 装管 2
2.2.2 装槽 2
2.2.3 电泳 2
2.2.4 剥胶 2
2.2.5显色3
2.2.6拍照 3
3.结果与讨论 3
3.3.1漆酶酶谱3
3.3.2讨论 3
参考文献3
致谢4
粗毛栓菌漆酶的酶谱分析
生物科学专业学生 田爱英
指导教师 孙迅
摘要 将粗毛栓菌接种在含有麦草粉的培养基中培养30d,浸提得粗酶液透析,将粗酶液进行等电聚焦后与愈创木酚反应获得漆酶酶谱。原文请找腾讯752018766优,文-论'文[网http://www.youerw.com
关键词 粗毛栓菌,漆酶,等电聚焦,酶谱
Tomography for Trametes gallica,'s Laccase
Student majoring in bioscience Tian Aiying
Tutor Sun Xun
Abstract Diameter gallery was cultivated in wheat powder for 30 days. The crude enzyme was extractioned and dialysised ,then the crude enzyme was reaction with guaiacol after the isoelectric focusing to obtain the tomography.
Key words Trametes gallica, laccase, isoelectric focusing [IEF],Zymogram
引言
漆酶是一种含铜的多酚氧化酶[1],最早是从日本的漆树汁中发现的,是人类最早发现的酶之一,但直到现在,人们对它的认识还不完整[2]。近年来,随着漆酶功能的逐步发现,有关漆酶的研究受到普遍的重视。由于在降解木质素方面的功能,使之在制浆造纸工业,特别是纸浆生物漂白领域得到深入的研究和开发[3,4],在环保方面也有很大的潜力[5],可与有毒的酚类作用,使含苯氧基类的除草剂、石油化工废物的物质解去毒性等[6]。
随着应用的不断加深,漆酶的研究和开发越来越受到人们的关注[7]。本文就以漆酶的粗酶液进行等电聚焦测定其同工酶谱。
1实验材料
1.1.1 仪器
圆盘电泳DYCZ-27 DYY-8C型电泳仪(北京优一仪器厂) 玻璃管长10cm,内径0.5cm 8-10个 烧杯40ml一个 烧瓶50ml一个 培养皿一套 电子天平 移液枪 玻璃棒 容量瓶500ml两个 量筒
1.1.2 试剂
丙烯酰胺(29g/100ml) 甲叉双丙烯酰胺(1g/100ml) 两性电解质Ampholine(40%、pH3-10)(50mg/ml) 过硫酸铵(0.5mg/ml) TEMED(1mg/ml) H2SO4
(0.4%)500ml NaOH(0.4%)500ml 琼脂糖(0.7g/100ml)愈创木酚0.02mmol/
1.1.3 菌种
菌种是由菏泽学院孙迅博士提供。从山东菏泽树木上采集分离所得。经鉴定为粗毛栓菌Trametes gallica。