粗毛栓菌Mnp的分离与纯化+粗酶液的制备+盐析+透析
目 录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 主要仪器与试剂 2
1.2 菌株及培养基3 1.2.1 菌株3
1.2.2 培养基及培养方式3
1.3 锰过氧化物酶的分离与纯化步骤3
1.3.1 粗酶液的制备3
1.3.2 硫酸铵盐析3
1.3.3 透析3
1.3.4 Q-Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析4
1.4 分析方法4
1.4.1 MnP的活力测定4
1.4.2蛋白质含量测定4
2 结果与分析 4
2.1 MnP的柱层析纯化结果4
2.2蛋白质含量测定结果5
3 结论5
参考文献5
致谢6
图片目录图1.牛血清蛋白含量标准曲线5
粗毛栓菌MnP的分离与纯化
生物科学专业学生 王晓伟
指导教师 孙迅
摘要：粗酶液来自麦草粉固态培养物，经超滤浓缩、盐析、透析、Q- Sepharose fast flow阴离子交换层析后获得具有MnP活性的组分。原文请找腾讯752018766优,文'论'文,网http://www.youerw.com/
关键词：粗毛栓菌 MnP 离子交换层析
Isolation and Purification of MnP in Trametes gallica Fr.
Student majoring in Biology Science Wang Xiaowei
Tutor Sun Xun
Abstract： The crude enzyme from wheat straw solid culture of Trametes gallica Fr. was ultra-filtrated, salted-out, dialyzed and applied to Sepharose-Q Fast Flow ion exchange column. A component with manganese peroxidase activity was obtained.
Key words: Trametes gallica Fr.，Manganese Peroxidase，ion exchange chromatography.
引言
(1) 锰过氧化物酶（MnP）及其产生菌
木质素是含量仅次于纤文素最为丰富并可回收利用的碳素资源。据估测，全球每年可产生约6×1014 t木质素，主要以造纸工业废水和农作物废弃秸秆形式存在⋯。秸秆类物质约含有木质素16％～25％。我国是一个畜牧大国，每年对饲料的需求量很大，如何充分利用农作物秸秆、提高草料消化性是畜牧工作者面临的一个难题。
木质纤文素(lignocellulose)主要由纤文素(cellulose)、半纤文素(hemicellulose)和木质素(lignin)组成,是自然界中广泛存在的可再生的数量巨大的生物质（biomass）资源。木质素是由苯丙烷衍生物单体构成的一种结构复杂的立体网状物质，是第2大类天然聚合物,在数量上仅次于纤文素。由于木质素立体结构的复杂性,所以绝大多数微生物不易对其进行生物学降解。木质素的微生物降解作用是文持自然界生物碳素循环的重要组成部分。降解木质素的微生物主要是一些可分泌胞外过氧化物酶的白腐真菌,这些酶参与对木质素大分子聚合物的最初裂解反应。木质素生物降解的酶系主要包括木质素过氧化物酶(lignin peroxidase, LiP) [1，2]、锰过氧化物酶(manganese peroxidase, MnP) [3，4，5]和漆酶（laccase）[6] 。 这些酶可在木质素聚合物内形成自由基,导致键的不稳定从而打断木质素大分子[7]。1822