粗毛栓菌木质素过氧化物酶的分离与纯化
一、立题依据(国内外研究进展或选题背景、研究意义等)
随着人类对环境污染和资源危机等问题的认识不断深入 ,天然高分子所具有的可再生、可降解等性质日益受到重视。废弃物的资源化与可再生资源的利用 ,是当代经济与社会发展的重大课题 ,也是对当代科学技术提出的新要求。制浆造纸工业的废液中含有大量的木质素成分,白腐菌是目前己知能够将木质素彻底降解为二氧化碳和水的唯一生物。粗毛栓菌优先降解木质素 ,是生物制浆中原料预处理的优良菌株[5]。因此,研究白腐菌对木质素的降解有利于资源的有效利用和保护环境,对人类社会的可持续发展具有重要的现实意义,其应用前景十分广阔[11]。
木质素过氧化物酶(LiP)最早在白腐真菌中发现,也是目前研究最清楚的木质素降解酶,有研究表明,粗毛栓菌能够产生具有木质素过氧化物酶活性的原酶液,但由于产量较少,尚不能用于大规模高效处理造纸废液[7] [8] [9] 。本论文在前人研究的基础上,重点对粗毛栓菌木质素过氧化物酶进行分离纯化工作,并进行酶活测定,进一步探究本实验条件下粗毛栓菌木质素过氧化物酶的产量,对于研究粗毛栓菌木质素过氧化物酶的工业化应用具有重要的理论意义。
二、研究的主要内容及预期目标
主要内容:对木质素过氧化物酶进行分离纯化。
预期目标:获得具有木质素过氧化物酶活性的组分。
三、研究方案(思路)
产酶培养基 → 浸提 → 超滤 → 盐析 → 透析 → 离子交换柱层析 → 酶活分析
问1: 你为什么选择这一论文题目?
答 :随着人类对环境污染和资源危机等问题认识的不断深入 ,天然高分子所具有的可再生、可降解等性质日益受到重视。研究白腐菌对木质素的降解有利于资源的有效利用和保护环境,对人类社会的可持续发展具有重要的现实意义。本实验在前人研究的基础上,重点对粗毛栓菌木质素过氧化物酶进行初步的分离和纯化工作。
问2: 本实验离子交换层析中的平衡缓冲液和洗脱缓冲液是什么?pH是多少?
答 :平衡缓冲液是20 mmol/L乙酸钠缓冲液,洗脱缓冲液是20 mmol/L乙酸钠缓冲液和由此溶液配制的1 mol/L NaCl。两者均为pH 5.5。原文请找腾讯752018766优,文-论'文.网http://www.youerw.com
问3:进行洗脱时流速是多少?每管体积是多少?
答 :流速是1 mL/min ,每3分钟收集一管,每管3mL。
问4:如何提高粗毛栓菌产LiP的产酶量?
答 :我认为应该从以下几个方面研究:<1.> 改良菌种,对产酶菌株进行广泛筛选,并通过诱变育种,筛选出产酶能力较高的菌株<2.> 进行产酶条件研究,比如振荡与静置培养条件、碳氮源种类及比例、培养时间、温度、诱变剂等。
论文答辩评语:
该生介绍了论文的主要目的、内容与结果,能够正确回答有关提问。该生具备了一定的独立从事科学研究的能力。该论文达到了学士学位论文的水平。1848