毕业论文论文范文课程设计实践报告法律论文英语论文教学论文医学论文农学论文艺术论文行政论文管理论文计算机安全
您现在的位置: 毕业论文 >> 医学论文 >> 正文

ω-3多不饱和脂肪酸对ARDS大鼠的保护作用及机制研究 第8页

更新时间:2014-5-15:  来源:毕业论文
程,计算出对应的样品浓度大小,实际测定浓度同稀释倍数的乘积数即为最终浓度数值。
8  免疫组化(SABC)法检测肺组织内的NF-κb蛋白表达
(1) 二甲苯梯度稀释液将已制好的蜡块切片脱蜡,脱蜡后的切片放进无水乙醇梯度稀释液内分离二甲苯。自来水下冲洗切片;
(2)已制备的30%H202 40mL与蒸馏水360mL混合,得浓度3%的H2O2室温存放5-9分钟,使内源性过氧化物酶灭活。切片置蒸馏水中冲洗,PBS浸泡6min;
(3)¬¬玻片放在染色架上,浸入pH为6.0的0.01M枸橼酸钠缓冲液内,使缓冲液盖过染色架。不锈钢锅盖封闭,缓慢加热,沸腾6分钟终止加热,放到室温下冷却至常温;
(4) 5%BSA封闭液加入试剂中,37℃反应28分钟,清除多余液体;
(5)滴入兔抗大鼠多克隆抗体,1:50稀释后37℃孵育90分钟。PBS冲洗4次,各10分钟,滴入羊抗兔IgG,1:50稀释后37℃孵育30分钟;
(6)PBS洗3次,各6分钟,滴入试剂SABC。37℃温育30分钟后PBS冲洗3次,各6分钟;
(7)加DAB显色,镜下控制作用时间。可见棕黄色颗粒表示结果阳性;
(8)苏木素复染6-10分钟,用蒸馏水反复冲洗6分钟,浸入饱和Na2HPO4的溶液中各4分钟,取出后洗涤干燥。中性树胶封片,在显微镜下观察。
    每批染色都滴加PBS替代一抗作为阴性对照。
10  统计学处理
采用SPSS 13.0统计学软件,进行数据处理分析。资料用均数∮抨准差( ±S)表示,计量资料多组间比较采用单因素方差分析(one-way analysis of variance, ANOVA ),组间比较采用LSD检验,计数资料组间比较采用卡方检验。P<0.05为差异有统计学意义。

上一页  [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] 下一页

ω-3多不饱和脂肪酸对ARDS大鼠的保护作用及机制研究 第8页下载如图片无法显示或论文不完整,请联系qq752018766
设为首页 | 联系站长 | 友情链接 | 网站地图 |

copyright©youerw.com 优文论文网 严禁转载
如果本毕业论文网损害了您的利益或者侵犯了您的权利,请及时联系,我们一定会及时改正。