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生物法催化制备6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯(3)

时间:2023-11-26 11:18来源:毕业论文
在原核蛋白表达体系中,如E。coli(大肠埃希菌) 系统 ,外源基因通常需要诱导剂的诱导才能进行表达,IPTG是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十

在原核蛋白表达体系中,如E。coli(大肠埃希菌)系统,外源基因通常需要诱导剂的诱导才能进行表达,IPTG是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定。本实验利用IPTG为诱导剂,诱导羰基还原酶产酶。在不同生长阶段添加诱导剂IPTG对酶活有很大影响,从而会影响到不对称还原的产物。调节添加IPTG的时间分别为0、1、2、3、4、5 h。IPTG对反应的影响由图2所示,由图2可以明显看出,在菌体生长2 h后添加IPTG,羰基还原酶活力最高,为100%。这是因为IPTG添加时间过早菌量太少,酶产量过低;IPTG添加时间过晚,由于菌体已经成熟,体内蛋白合成代谢缓慢,影响目的蛋白的诱导表达。故2 h后添加IPTG,羰基还原酶产量最高。

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