就提取的方案而言，正交试验科学地挑选部分水平组合进行试验，实验个数是所考察水平数的平方。然而正交设计的试验往往因试验次数太多而导致试验周期长、费用高。而对于多水平、多因素试验，应用均匀设计方法，具有明显的优势[10]。论文网

均匀设计法是由我国数学家王元和方开泰(1978)基于数论与多元统计创造的一种新的适用于多因素、多水平试验的有效方法。由于正交设计的实验点是建立在“均匀分散”和“整齐可比”这两个互相制约的正交特性基础之上的，因而不可能再进一步减少实验次数[11]。但均匀设计则不再为“整齐可比”而设置实验点，因此大大减少了试验次数。即，采用均匀设计法，每个因素的每个水平只做一次试验，只有当水平数增加时，试验数才随水平数增加而增加[12]。目前，均匀设计已成为一种主要的试验设计方法，它有以下优点：

（1)充满空间。试验点具有很强的代表性。(2)稳健性。沿用回归设计的思想，对模型及模型变化没有很强的假定。(3)多水平。一个因素能安排水平数最多的试验设计。(4)连续性。试验次数随水平增加具有连续性。本文采用超声辅助均匀设计应用于鱼鳞提取，用高效液相色谱法分析提取物中鸟嘌呤

的含量，通过计算机软件模拟出较佳提取工艺，并将优化条件进行实际应用，目的为日后运用超声辅助提取鱼鳞中鸟嘌呤提供理论依据。

2实验部分

2。1仪器、试剂与材料

2。1。1仪器

Agilent1260高效液相色谱仪（美国）；SK2210HF超声波清洗器；多用途恒温超声提取机(上海比朗仪器有限公司，总功率为650W)；SHZ-D(III)循环水式多用真空泵（巩义市科瑞仪器有限公司）；旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；TGL-16D台式高速离心机（常州海龙实验仪器有限公司）；LGJ-18S冷冻干燥机；DEY500摇摆粉碎机；电子天平。

2。1。2试剂

氯化钠、EDTA、磷酸二氢钠、盐酸、氢氧化钠均为分析纯；鸟嘌呤（分析纯），购置于南京奥多福尼生物科技有限公司。

2。1。3实验材料文献综述

鱼鳞采集于鱼江苏淮安农贸市场。

2。2标准样品的配制与鉴定

2。2。1标准溶液的配制

准确称取鸟嘌呤标准品1。3mg，用盐酸作为溶剂充分溶解，用磷酸二氢钠定容于250mL

容量瓶中，得浓度为5。2mg/L的鸟嘌呤标准液。

2。2。2高效液相色谱条件

参考了相关文献[13-15]以及上届学生毕业论文，选择的色谱条件为：色谱柱：C18柱(100mm×4。6mm，3。5μm)；流动相：磷酸二氢钠(0。05mol/L)；流速：0。5ml/min；检测波长：248nm；柱温：30℃；进样量：10μL。

2。2。3标准溶液保留时间的确定

取鸟嘌呤标准溶液0。4mL，经过滤膜后分别注入进样瓶中，根据2。2。2中的高效液相色谱条件进样，测得鸟嘌呤标准液的HPLC图谱