2。5  制备酶修饰电极

在修饰之前，玻碳电极（GCE直径3 mm，0。07 cm2）用细碳化硅纸修磨在1。0和0。3 μm的三氧化二铝抛光镜面表面，然后分别用水和乙醇进行超声处理。KMWCNTs修饰电极上ChOx的单独固定以及 ChOx和ChEt的共同固定是通过4℃下低温浸泡等步骤完成的。ChOx/KMWCNTs/GCE的制备如下。将1。0 mg KMWCNTs添加到2 mL重蒸馏水中，在超声震动下形成稳定黑色的悬浊液（KMWCNTs的浓度为0。5 mg·mL-1）。取5 μL KMWCNTs悬滴到预先处理过的GCE表面，再常温干燥，形成KMWCNTs修饰GCE。然后，把KMWCNTs修饰电极浸入到0。1 M含有10 U· mL-1 ChOx的PBS（pH = 7。4）中，在4 ℃的冰箱里放置10 h。最后，用0。1 M PBS（pH = 7。4）彻底冲洗去除弱吸附的酶分子，得到ChOx/KMWCNTs/GCE与ChOx/KMWCNTs/GCE的制备方法相比较，ChOx/GCE也就制备好了。这些酶修饰电极在不使用的时候被存储在0。1 mol·L- 1的PBS溶液中（pH = 7。4），在4 ℃ 冰箱中保存。

根据相同的步骤，ChEt/ChOx/KMWCNTs/GCE准备如下。ChEt和ChOx共同固定时，将KMWCNTs修改电极浸入ChOx溶液中（10 U· mL-1，溶解在0。1 M pH = 7。4 的PBS缓冲液中），放入4 ℃的冰箱10 h。之后，ChOx/KMWCNTs/GCE浸入ChEt标准溶液中（10 U· mL-1，溶解在0。1 M pH = 7。4 PBS缓冲液中），放入4 ℃的冰箱中10 h。最后，把准备好的ChEt/ChOx/KMWCNTs /GCE用0。1 M pH = 7。4的PBS缓冲溶液彻底冲洗去除弱吸附的酶分子。与ChEt/ChOx/KMWCNTs /GCE的制备步骤相比较， ChEt/ChOx/MWCNTs/GCE和ChEt/ChOx/GCE也就制备好了。这些酶修饰电极在不使用的时候被存储在0。1 mol·L-1的PBS溶液中（pH=7。4），在4 ℃ 冰箱中保存。

3  结果与讨论文献综述

3。1  钾掺杂多壁碳纳米管的表征

MWCNTs和KMWCNTs形貌的第一特征可以通过扫描电子显微镜（SEM）得到。图2a显示了MWCNTs的扫描电镜图像，可以看到，图中出现大量杂乱的MWCNTs，其形貌是直径约为10 nm的空心管结构。图2b显示了KMWCNTs的扫描电镜图像。掺钾之后，尽管有一些MWCNTs的结构没有破坏，但是我们可以观察到，在聚集的MWCNTs包之间仍然发生了掺钾。K/菲络合物在MWCNTs掺钾过程中的作用可以解释如下。溶液中的电子是由高电子亲和力的菲和钾反应生成络合物的同时通过金属K释放出来的，因此溶液中的K+能与1，2-DME分子发挥协同作用并和菲阴离子自由基配对[17,18]。这些协调的分子在MWCNT表面和MWCNT内部反应。并且菲作为一个大粒径的芳族烃化合物，可以提供连续的结合能，能够映射在MWCNT表面，MWCNT和菲之间的相互作用形成π-聚集。比如，当菲与苯的C6-环族配合时，我们发现菲分子很容易穿透MWCNT[13]。此外，K离子与菲结合容易形成分子配合物。最后，高机动性的K离子移动并插入MWCNT束从而诱导MWCNT掺钾。这意味着π-聚集的MWCNT掺杂是一种获得没有任何破坏原始管状形态的KMWCNTs的方法，这种方法非常有效。