表5.2 40℃常温下,苯丙氨醇在加入不同浓度三乙胺的实验数据
三乙胺% 保留时间1(min) 保留时间2(min) 理论塔板数1 理论塔板数2 分离度 K2 K2 α
0.6 13.960 15.375 7610 5528 1.95 1.997 2.301 1.152
0.5 14.376 15.852 8215 5799 2.01 2.078 2.394 1.152
0.4 14.356 15.826 7910 5625 1.97 2.083 2.400 1.151
0.3 14.472 15.899 8037 5833 1.93 2.143 2.453 1.144
0.2 15.772 17.461 8068 5516 2.05 2.497 2.873 1.149
0.1 16.538 18.289 8068 5981 2.08 2.669 3.057 1.145
小结:
在40℃的温度下,流速为0.60min/ml,流动相为甲醇:水=4:6时,在加入6种不同量三乙胺的条件下,样品的分离度没有特别明显的改变,但是加入三乙胺后,出峰状况明显改变,且三乙胺浓度增大是峰的拖尾状况明显好转。在三乙胺浓度大于0.3%时,已不见明显好转。因此可以得出,三乙胺浓度为0.3% ,是实验的最优的三乙胺含量条件。
5.1.3 不同流速对其拆分影响
在温度为 40℃下,流动相为甲醇:水为4:6时,在加入0.3%三乙胺的条件下,不同流速时,样品苯丙氨醇的拆分情况。
表5.3 40℃常温下,样品苯丙氨醇在不同流速下的实验数据
流速 ml/min 保留时间1(min) 保留时间2(min) 理论塔板数1 理论塔板数2 分离度 k1 k2 α
0.4 22.630 24.954 7969 5818 2.00 2.304 2.643 1.147
0.5 17.352 19.150 8947 6141 2.10 2.116 2.439 1.153
0.6 15.074 16.587 8136 6171 1.99 2.307 2.637 1.143
小结:
在40℃的温度下,流动相为甲醇:水=4:6时,在加入0.3%三乙胺的条件下,分别在流速为0.4 min/ml、0.5min/ml、0.6 min/ml下分离,样品的分离度基本稳定在2.0左右,因此流速的改变对于样品的分离度影响不大。综合出峰时间、实验压力等影响,选用0.6 min/ml为最佳实验流速条件。
5.1.4 不同温度对其拆分影响
在流速为0.60min/ml,流动相为甲醇:水为4:6时,在加入0.3%三乙胺的条件下,在不同温度时,样品苯丙氨醇的拆分情况。
表5.4 在相同条件下,样品在不同温度时的实验数据
温度(℃) 保留时间1(min) 保留时间2(min) 理论塔板数1 理论塔板数2 分离度 k1 k2 α HPLC使用键合型多糖手性柱拆分对映体(5):http://www.youerw.com/huaxue/lunwen_2107.html