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二氧化氯结合钙处理对枇杷抗氧化酶活性的影响(3)

时间:2020-08-20 15:45来源:毕业论文
参照Aebi法[12]。取0.5g果肉,于0.05mol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)5mL中,冰浴研磨,4℃冰冻离心机10000r/min离心20min,取上清液测定酶活性。CAT反应体系包括100L粗酶液

参照Aebi法[12]。取0.5g果肉,于0.05mol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)5mL中,冰浴研磨,4℃冰冻离心机10000r/min离心20min,取上清液测定酶活性。CAT反应体系包括100μL粗酶液、3mL 0.05mol/L PH 7.0的磷酸缓冲液和200μL 0.3% H2O2,摇匀,在UV-优尔分光光度计测得240nm处的吸光度值,每隔0.5min记录一次变化值,连续计5min,重复2次。

1.3.4 丙二醛(MDA)含量的测定

MDA含量用硫代巴比妥酸法(TBA)[13]测定。取3g果肉,于0.05mol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)30mL中,冰浴研磨,4℃冰冻离心机10000r/min离心20min,取上清液测定酶活性。在1.0mL粗酶液中加入2.5mL 10.5%的硫代巴比妥酸(TBA)(用10%三氯乙酸配制),沸水浴20min,冷却后在722S分光光度计上分别测定450nm、532nm、600nm处吸光值。

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