腊梅花（学名：Chimonanthus praecox）为腊梅科植物。腊梅的花蕾干燥，又名雪里花，一般会在11月中旬开花到次年3月左右结束，花期很长。初春花未开放时采摘，可及时低温干燥储存。腊梅花拥有解暑生津、顺气开郁的功能，这可以用于解决暑热心烦、头晕、胸闷口渴、梅核气、咽喉肿痛、小儿麻疹、百日咳、水火烫伤等问题。在湖北、江苏、浙江、四川、贵州等地均有产出[8-9]。

女贞叶（学名：Ligustrum lucidum Ait.）的别名：冬青叶，土金刚叶、爆竹叶（《贵州民间方药集》）。化学成分主要有齐墩果酸（oleanolic acid），对一羟基苯乙醇。用它新鲜的叶子与干青蒿制成的针剂能在体外进行实验，实验结果表明了其对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌皆有抑制作用(试管法、平板法)，其有效成分可能会是鞣酸、丁香甙和青蒿的结合物。肌注后能很好的吸收，无明显毒性[10]。

目前，已有对植物中的儿茶素、橙皮素的分离与测定以及对植物中齐墩果酸、熊果酸的分离与鉴别等许多研究和报导[11-12]，但是还没有见到关于用高效液相色谱法对植物中两种黄酮类化合物和三萜类化合物含量的同时测定的方法的研究。本文针对此方法做初步研究，为建立多种黄酮类化合物和三萜类化合物同时测定的方法提供依据。

2  实验部分

2.1  材料、仪器与试剂

材料：四种植物（枇杷花、枇杷叶、腊梅花、女贞叶）于2014年采摘于淮阴师范学院王营校区内以标明的树上,置于冷冻干燥机干燥使用。

仪器：高效液相色谱仪（HPLC）（Agilent Technologies 1260 Infinity）、T-214电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）、LJG-18S冷冻干燥机（河南兄弟仪器设备有限公司）、旋转蒸发器RE-3000（上海亚荣生化仪器厂）、多用途恒温超声波提取机（上海比朗仪器有限公司）、500克摇摆式高速万能粉碎机、KQ-100VDB型三频数控超声波清洗器、SHZ-D（Ⅲ）循环水式多用真空泵（巩义市科瑞仪器有限公司）。

试剂：橙皮素标准样品、儿茶素标准样品、齐墩果酸标准样品和熊果酸标准样品（均购于贵州迪大生物科技有限责任公司）；95%乙醇（国药集团化学试剂有限公司），甲醇（色谱纯）（天津基准化学试剂有限公司），甲醇（分析纯）（上海实意化学试剂有限公司），乙腈（色谱纯）（国药集团化学试剂有限公司），乙酸铵（分析纯）（上海实意化学试剂有限公司）。

2.2  紫外波长的确定[13-14]

取儿茶素、橙皮素、齐墩果酸、熊果酸标准溶液，用紫外/可见分光光度计于180~330nm波长范围内，以1nm为单位进行全波长扫描，得到吸收曲线。根据已经得到的吸收曲线确定检测波长。

2.3  色谱条件

色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18（4.6×100㎜，3.5μm）；流动相为甲醇-乙腈-乙酸铵（55：27：18）；流速为0.6ml/min；柱温：25℃；进样量：10μL；检测波长：0-8分钟波长为280nm，8分钟后波长为210nm。

2.4  实验部分

2.4.1  标准样品溶液的配制

儿茶素标准样品的配制：准确称取0.0085g儿茶素标准样品，用甲醇（AR）充分溶解，定容于50mL容量瓶中，得浓度为0.1700mg/mL的儿茶素标准液。

橙皮素标准样品的配制：准确称取0.0085g橙皮素标准样品，用甲醇（AR）充分溶解，定容于50mL容量瓶中，得浓度为0.1700mg/mL的橙皮素标准液。

熊果酸标准样品的配制：准确称取0.0170g熊果酸标准样品，用甲醇（AR）充分溶解并定容于50mL容量瓶中，得浓度为0.3400mg/mL的熊果酸标准液。

齐墩果酸标准样品的配制：准确称取0.0075g齐墩果酸标准样品，用甲醇（AR）充分溶解，定容于50mL容量瓶中，得浓度为0.1500mg/mL的齐墩果酸标准液。 枇杷等植物中黄酮类和三萜类化合物的同时测定方法(2):http://www.youerw.com/huaxue/lunwen_65075.html