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1 微生物群落分子生物学研究方法

通过现代分子生物学的研究方法能更高效全面的揭示堆肥过程中微生物的群落特征，主要的方法有荧光原位杂交法、变性梯度凝胶电泳、温度梯度凝胶电泳、限制性片多态性分析、DNA微距阵以及宏基因组分析等。随着高通量测序技术（High-throughput sequencing）[9-11]等研究方法的应用，更加全面深入地揭示了堆肥过程中微生物的生态结构，为系统的了解微生物在整个堆肥过程中所起的作用和产生的影响提供了有效手段[12,13]。85192

2 堆肥VOCs微生物生态研究

堆肥化的过程通常分为三个时期，即常温期（数天时间，温度通常在50℃以下）、高温期（数天至数周时间，温度在50℃以上）、降温腐熟期（通常持续数周至几个月），不同时期下堆肥整体理化环境的变化和微生物可利用底物的改变驱使整个堆肥微生物群落结构发生演替。论文网

喻曼[14]等人利用PLFA分析方法，发现革兰氏阳性菌的含量随着堆肥时期的变化较大，而革兰氏阴性菌的含量较低， 用DGGE分析方法发现在堆肥整个过程中微生物的群落结构发生了很大变化。Ishii[15]等人通过PCR-DGGE的方法研究了实验室规模下垃圾堆肥的微生物群落演替变化，发现类肠系膜明串珠菌（Leuconostoc paramesenteroides），乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）和鱼发酵葡萄球菌（Staphylococcus piscifermentans）是前四天常温期里主要的微生物，而到了高温期，芽孢杆菌属的含量开始显著增加，当堆肥进入降温期时，梭菌属（Clostridium）、差异球菌属（Alloiococcus）和鞘氨醇杆菌属（Sphingobacterium）等开始出现，而到腐熟期节细菌属（Arthrobacter）也开始出现。Tian[16]等人利用牛粪和水稻壳进行堆肥，结果发现在高温期占主导地位的是放线菌门，拟杆菌门和绿弯菌门各个时期都存在，厚壁菌门和变形菌门微生物在各个时期都拥有明显的丰度。