微卫星（microsatellites）也被称为简单序列重复（simple sequence repeats，SSR），它的组成部分是由一类的由几个核苷酸（1-5个）的DNA序列，这几个核苷酸是为重复单位组成的长达几十个核苷酸，较短的长度，在染色体上广泛分布 [2] 。之所以它是一种十分理想的分子标记，是因为它具有较高的多态性、共显性、用(PCR)检测时简单方便和稳定可靠的结果等特点。造成SSR长度具有高度的变异性的因素有两个方面：第一个是不完全相同的重复程度，第二个是重复单位的次数不同。正因为SSR具有高度的变异性，所以被用于构建作物品种的标准指纹，也被认为是最有希望的分子标记之一。SSR能使用微卫星区特异性序列设计引物，通过PCR进行扩增，琼脂糖凝胶进行电泳，从而显示出不同个体之间SSR基因座的多态性，是因为它的序列的两端一般都是保守的单拷贝序列，即使它们在基因组上的SSR位置不同。

作物品种鉴定是农业生产中重要的、不可缺少的步骤。作物品种鉴定之所以成为一个最重要的环节，是因为它有很多的优点：1）能充分的发挥优良品种所带有的优异遗传性状；2）防止了品种的退化；3）使农业生产的高产量和稳定产量得到提升；4）种子的质量得到稳定的提高；5）也阻止了品种因为多而混乱的状况[3]。通过构建大麦的SSR图谱，对研究大麦亲本材料的遗传多样性，寻找与部分农艺性状相关联的分子标记，为组合大麦杂交的配置及分子标记辅助育种提供依据[4]。

分子标记技术现在已经被广泛应用于大麦的遗传多样性研究，是因为随着分子生物学技术的发展，分子标记种类及检测手段的逐渐完善。目前，GrainGenes2。0网站（http:// wheat。pw。usda。gov /GG2/index。shtml）公布的有1000多个大麦SSR标记，也为分子技术的研究上提供了强有力的基础。论文网

关于如何使用SSR标记技术来分析大麦遗传多样性的差异，在国内外已经有很多的报道。Matus等使用22个SSR标记分析147种代表性大麦材料的遗传多样性，包括品种、遗传图谱和核心种质。共检测到687个等位基因，品种和地图多样性丰富。Brantestam等[5]对北欧和波罗的海区域的197份春大麦进行了遗传多样性研究，也是充分利用了22个SSR标记技术，使他们成功的检测出了191个等位变异，平均每个标记检测的变异在2-23个，研究表明，当今栽培种的遗传多样性有了一定的变化，与早期品种相比，这种遗传的多样性越发的明显了，也带动了一些起源地材料发生了改变。Sun等[6]也将研究指向了中国西藏野生大麦及世界各起源地的部分大麦材料，充分的利用42个SSR标记进行了遗传多样性研究，也对14个数量性状进行了关联分析。

本实验重点对51份欧洲大麦亲本材料进行了遗传多样性 [7]分析，构建相对应的指纹图谱，从而确定大麦亲本材料间的遗传背景差异，也为后期的一系列育种工作中提供了有价值的参考。

1、材料与方法

1、1材料

1、1、1 实验材料

在本实验中，从欧洲大麦种质资源中获得了51份样品，提取DNA，直到DNA完成提取。

1、1、2 实验试剂

本实验所用试剂包括氯仿、蒸馏水、异戊醇、75%酒精、琼脂糖、TBE、核酸染料、loading buffer。

1、2 方法

1、2、1 DNA提取和PCR扩增

DNA提取：采用CATB的方法：①样品加CTAB（氯仿：异戊醇＝24：1）750μL剧烈摇一下，水浴65℃（40-45min); ②加入500μL氯仿后，快速剧烈摇晃使之均匀，在桌面静放5-10min,12000rp离心8min 后，弃废弃物取上清液; ③加入等体积（500μL）异丙醇，轻轻颠倒多次，放置4℃内半个小时;④12000rp离心6min弃上清液取沉淀物,用75%酒精洗DNA,并晾干; ⑤加150μL ddH2O放置于4℃保存。 欧洲大麦品种SSR指纹图谱的构建(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_176815.html