对二甲苯及其甲基化衍生物，间、邻二甲苯是芳香族挥发性有机物。随着PX的广泛使用，PX逐渐被认为是对斑马鱼及两栖动物的生存、生长和发育有毒性作用的化学物质[6]。科学家们还发现苯，甲苯，二甲苯对胚胎发育有明显抑制作用[7,8]，有些还有母性毒害[9]。 

前人对小鼠肺部组织，近端肾小管，果蝇和小鼠淋巴球进行研究，发现暴露在苯，甲苯中，其凋亡细胞数目都明显增加[10-12]。这说明，苯，甲苯和二甲苯对幼体有毒性效应。有研究指出其亲脂性的挥发性有机溶剂可能通过与脂膜间的相互作用来发挥影响[13]。而且,长期暴露在PX中会降低小鼠视网膜轴突输送，进而导致神经元损伤[14,15]。另外，表观调控在神经毒性和神经元疾病的转录表达调控中起到重要的作用[16]。有研究表明，组蛋白去乙酰化酶的异常升高会导致体外培养神经元的神经毒性及小鼠皮质神经元的死亡[1,17]。染色体和基因调控是由组蛋白甲基转移酶，去乙酰化酶控制赖氨酸残基的甲基化和乙酰化完成的[18,19]。H3K9的二甲基化和H4K12的乙酰化作用和基因沉默有关。然而，现今还没有PX对大脑发育过程中组蛋白修饰的细胞影响机制的报道。 论文网

人类或动物长期暴露在二甲苯和乙苯的混合物中能引起听力丧失，接触乙苯或二甲苯的老鼠易产生耳毒性，影响神经系统和呼吸系统功能[20]。甲苯复合物可显著抑制斑马鱼胚胎的正常发育，造成胚胎畸变率、死亡率比例的增加，以及胚胎发育迟缓 [21]。但是,目前对二甲苯对水生生态系统的影响尚缺乏深入了解, 其中对动物早期生长发育过程中的毒性效应还没有较多研究。本实验以非洲爪蟾这一水生生物作为研究对象，研究对二甲苯对其生长发育的影响。作为模式生物，与非洲爪蟾相似的还有一种热带爪蟾，他们是亲缘关系相近的两个不同的种。两类爪蟾研究在生物医学上的应用较为普遍，在医学基础和临床及药物筛选研究中占有重要地位[22]。现阶段大多数研究致力于爪蟾的生物医学效应、毒性效应和胚胎致畸的表型特征等[23,24]。以此为前提，通过研究环境污染物对爪蟾等两栖动物的毒性效应进而监测环境变化，已成为国内外研究热点，其细胞、组织和生理生化过程都会发生显著差异，进而影响其存活和生长发育，从而在环境毒理学研究中发挥越来越重要的作用。   

随着市场需求的日益扩大，人们对PX的认识和关注度也逐渐提高。对二甲苯作为一种具有污染性且有刺激性气味的化合物，虽然在工商业做出贡献，但其对环境有影响，对生物的生存，生长和发育也会有毒害作用[25]。科学家们还发现苯类有机物对胚胎发育有明显抑制作用，长期暴露在二甲苯中容易导致神经生理功能紊乱、贫血、白血病等症状[26]。在此基础上，人们关于PX对大脑发育和动物行为的毒性效应细胞机制尚不清楚，也没有PX对大脑发育中组蛋白修饰的细胞影响机制的报告。 

因此，本项目以非洲爪蟾作为模式动物，通过观察发育过程中PX对蝌蚪视顶盖组蛋白H3K9,H4K12分子表达的影响，研究PX作为污染物对动物早期生长表观遗传调控的毒性作用，探讨其引发蝌蚪大脑发育影响的作用机制。本项目还试图寻找一种可以缓解PX毒性作用的药物。通过比较PX处理，PX和药物混合处理的蝌蚪的视顶盖蛋白表达变化，研究药物的解毒作用，也为今后在环境监测、药物筛选和新药开发领域提供有价值的参考信息。

2 材料与方法

2。1 实验动物、试剂及仪器

本项目以非洲爪蟾作为模式动物，以PX为外源污染物，研究PX对蝌蚪生长发育及视顶盖蛋白表达的影响。实验室非洲爪蟾人工饲养在大中型玻璃水族箱中，水温20℃左右。其体长可达12cm，头部及身体扁平，雄性体型约为雌性的一半。性成熟的成蛙会在前肢长出黑色的婚垫，是为了抱住雌蛙便于交配。实验室一般进行人工注射激素，促进抱对交配产卵。受精卵长成蝌蚪大约一周，全身透明，头部较大，可见脑的组成及部分脑神经走向，便于实验观察[27]。非洲爪蟾终生生活在水中，常年可以排卵孵化，且易于饲养管理， 方便实验操作并有助于实验的连续进行。 对二甲苯PX对视顶盖表观遗传调控的影响(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_196750.html