肽链上2个半胱氨酸(Cys)残基的巯基(-SH)基团发生氧化反应所形成的共价键叫二硫键[9]。生物体中的二硫键一般由两个半胱氨酸残基共价交联而成,容易被还原而断裂,断裂后又可氧化重新形成二硫键,而作为生物体中含量最多的非蛋白巯基源,谷胱甘肽(GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸、和甘氨酸组成的活性三肽,其活性中心为巯基[10]。因此,GSH存在两种状态—氧化型和还原型 ,维持着细胞内的氧化还原平衡。生物体中含有大量游离的硫醇,其中,GSH是细胞内最多的小分子生物硫醇(1~10 mmol/L)[11]。硫醇可以将二硫键裂解,并且二硫键对不同浓度的GSH刺激响应性不同,加之,癌细胞中的GSH浓度远远高于与之相应的正常细胞,这些特点广泛应用于抗癌药物输送系统。因此近年来基于二硫键的荧光探针成为一个重要的研究领域。文献综述
以对硝基苯甲醛,叠氮纳,异佛尔酮,丙二腈为主要原料,合成具有荧光性的腈基杂环化合物荧光探针,该化合物由腈基、六元杂环、苯环、二硫键等构成。腈基杂环化合物中含有两个强的吸电子基团的腈基[12],为双键共轭环状结构,因共轭体系大、π电子的离域性强而激发产生荧光[13],本文在腈基的结构上进一步修饰,以扩大其离域体系从而延长其荧光波长,即共轭芳香环增大,荧光效率增大[14]。在此基础上,化合物TCM-N3即可与GSH可切断的二硫键合成TCM-S,但本文要合成的是将二硫键替换为不可切断的碳碳键的参比化合物TCM-C。因其结构中没有二硫键,因而硫醇不能降解TCM-C,就不会对GSH 产生响应性,对基于二硫键的荧光探针起到良好的对照作用。如在武絮蒙的荧光探针研究中,利用碳碳双键取代二硫键作对照组,做荧光探针的细胞毒性,细胞成像,细胞摄入以及活体等的一系列实验,成功实现对整个前药控制和释放过程的原位可视化监测[14]。该实验过程中,碳碳双键作对照是不可缺少的。
腈基杂环荧光探针TCM-C的设计合成及表征(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_200362.html