产木聚糖酶黑曲霉的ARTP诱变育种

摘要：以黑曲霉W1为出发菌株，对其进行ARTP诱变系统处理，结合透明圈法和DNS法从中筛选出一株酶活较高的菌株B3。实验先对发酵培养基碳源种类和发酵时间的优化，得出产木聚糖酶的最佳条件，即麦麸为最佳碳源，发酵时间为72h。在此条件下出发菌株W1经ARTP诱变150S后，木聚糖酶活力可达到118。552U/mL。93455

毕业论文关键词：黑曲霉，木聚糖酶，诱变，酶活力

Abstract: Suppose the Aspergillus niger W1 as a original strain。By treating of the mutation of the atmospheric room temperature plasma(ARTP),a high xylanase producing strain B3 was screened by the way clear halo comparison and DNS。Producing xylanase by liquid fementation has many control factors。By analysis on the different effecting conditions of fementation on the measuring results,such as carbon source containing and fementation time,tne suitable conditions to educates term is:the optimum carbohydrate source was bran,educate time was 72h。Under this condition ,the max activity of xylanase is 118。552U/mL。来自优O尔P论R文T网WWw.YoueRw.com 加QQ7520`18766

Keywords：Aspergillus niger,Xylanase,Mutant,Enzyme activity

1。前言 6

2 材料与方法 7

2。1 材料 7

2。1。1 出发菌株 7

2。1。2 仪器 7

2。1。3 培养基 8

2。2 方法 8

2。2。1菌种活化 8

2。2。2单孢子悬浮液的制备 8

2。2。3黑曲霉的诱变和筛选 8

2。2。3。1 孢子悬液的制备同2。2。2 8

2。2。3。2 ARTP等离子体诱变 8

2。2。3。3 平板初筛 9

2。2。3。4液体发酵复筛 9

2。2。4木聚糖酶的酶活测定 9

2。2。4。1木聚糖酶酶活力国际单位定义 9

2。2。4。2 木糖标准曲线的制备 9

2。2。4。3 DNS 酶活测定方法［19］ 10

2。2。4。4 木聚糖酶的酶活公式 10

3 结果与分析 10

3。1 木糖标准曲线 10

3。2 影响木聚糖产酶的酶活力因素 11

3。2。1 培养基碳源对黑曲霉产木聚糖酶活的影响 11

3。2。2 发酵时间的影响 11

3。3 不同ARTP等离子体诱变时间的结果统计 12

3。3。1 诱变后菌种初筛 12

3。3。2不同时间ARTP等离子体诱变时间黑曲霉致死率 13

3。3。3出发菌株与突变株的木聚糖酶活比较 13

结论 14

参考文献 15

致谢 17

1。前言

　现如今，因为能源短缺问题已越来越受人们的重视，所以随着化石燃料的持续消耗，能源短缺问题已成为人类面临的共同问题，寻找新能源已经关系到未来经济的可持续发展甚至关系到人类未来的生存问题。每年地球上有大于100亿t植物干物质由光合作用产生，其中一半以上是纤维素或半纤维素[1]。木聚糖（xylan）作为植物半纤维素的重要组分，是一种多聚五碳糖,是含量仅次于植物细胞壁中纤维素的一种可再生生物资源，约占细胞干重的35%［2］。在自然条件下,木聚糖很难被降解利用，虽然可以用一些化学方法来提高木聚糖的降解率，但也会影响其他操作，甚至会给人类的健康带来危害。而木聚糖酶能够将自然界中含量丰富的木聚糖降解生成可利用的单糖，或降解生成功能性低聚木糖产品，可用于化学或生物化学加工，或用来制备食品、酒精、单细胞蛋白、医药品及其化学化工原料，从而为人类解决粮食、资源、能源等危机提供重要途径［3］。产木聚糖酶黑曲霉的ARTP诱变育种:http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_201295.html