1。2。4 球孢白僵菌对地下害虫的防治

地下害虫之所以称为地下,指的这一类虫子主要都是在土壤中生活,只有很少的时间 会从地下出来,这类虫子的食物主要是植物在地下的根或者经,所以会对植物造成危害,我 们也将它称为土壤害虫。地下害虫种类很多,而且分布广泛,具有很大的危害。目前我们 认为造成巨大危害的地下害虫有蟋蟀、蛴螬、地老虎、蝼蛄,当然不仅仅是这些,白蚁、 根蝽这些也称为地下害虫,它们对植物会造成重大危害。因为这些害虫的巨大危害,我们 一般是采用化学农药,杀虫剂或者其它方法防治它。但是因为基因存在变异性,会产生害 虫的抗药性随着化学制剂的使用而增加,随之产生的问题就是,为了达到杀虫目的,农药被 更大剂量的使用,农药的毒性也会越来越高,造成污染环境,并且残留的农药会通过食物链 在人体富集,危害人体健康,这就违背了现在人们提出绿色环保的这一愿望,同时因为食物 链的关系,这些害虫的天敌也会中毒,进而造成害虫天敌的种群和数量大大减少。这一系 列问题所造成的后果就是地下害虫的问题越来越严重。因此人们不得不考虑新的对地下 害虫的防治方法。白僵菌用于地下害虫的防治,我们将它放在土壤中,不仅当年就可以控 制或者减少蛴螬数量,而且还具有持续作用,第二年还有作用。有报导［27］称,有人利用白 僵菌防治剂与 3911 混合使用,大大提高了白僵菌的使用效率,这也为更高效的使用提供了线索。文献综述

1。3 DNA 二代测序

1。3。1 DNA 二代测序简介

很早人们就认识了知道了 DNA 的存在,但 DNA 的基本信息是什么,这个问题一直困 扰 着 我 们 , 作 为 一 种 重 要 的 实 验 分 析 技 术 ,DNA 测 序 技 术 早 在 DNA 双 螺 旋 结 构 (WatsonandCrick,1953)刚刚被发现之后,就有了关于测序技术的报导［28］。DNA 测序技术 在生物学的研究中有着很广泛的应用。但因为当时实验条件的限制,因此在具体的测序过 程中,具体操作流程十分复杂,不能达到高效,准确,因此不能形成规模[29]。之后，在 1977 年,Sanger 发明了末端终止测序法,这一发明在生物历史中具有里程碑意义。就在那一年 A。M。Maxam 和 W。Gilbert 在大量研究［30］下,发明了化学降解法。Sanger 法操作方法简 便快速,而且后面科学家一直在不断改进,使得这种方法更加完善,让这种方法称为目前我 们主要原因的测序方法。但同时,我们知道现在的科学技术发展的很快,就现在的情况来 看,传统的 Sanger 测序已经不够用了,对于有些研究,它测得的东西无法满足研究者的要求, 这就要求人们要发明另一种更便宜,更高效,速度也比前面更快的测序技术[31],就因为这 些要求第二代测序技术(Next-generationsequencing)顺应时代要求出现了。从这三种测序 技术的综合性能来看,这三种测序技术各自有各自的特点,454FLX 与其他两种相比有更 长的测序 CD,它的高质量的读长(read)可以达到 400bp;Solexa 测序方法具有更低的售价, 而且在我们用的时候,它的运行成本也是最低的,在相同数据量的情况下,成本只有 454 测 序的 1/10;SOLID 测序的准确度与其他两种相比更高,它的原始碱基数据的准确度可以达 到 99。94%,这在三种测序方法中是比较最高的［32］。

1。3。2  测序技术发展历程

DNA 测序的目的就是为了认识生命的本质,了解生物的差异性,以及不同的生物进化 和发展历史,DNA 测序对重组 DNA 的研究提供了方向,DNA 测序在疾病诊断和基因分型 中起着重要的作用。

自 20 世纪 70 年代,第一代测序技术被发明,人们从此开始了对基因的深度探索,这一

技术发展至今将近四十年时间,测序技术已取得了相当大的发展［27］。虽然就现在形势 看来,在全球测序市场上第二代短读长测序技术仍然占有着绝对的优势位置,但第三测序 技术也在逐步成熟之中。测序技术的每一次变革,都对基因组研究,疾病研究,药物研发等 领域产生巨大的推动作用。 白僵菌线粒体基因分析(6):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_96599.html