幼虫化蛹8天左右时，将蛹从小塑料杯内取出置于培养皿内，雌雄蛹分别放于两个养虫笼中。一部分蛹待成虫羽化后在养虫笼内放入浸有10%蜂蜜水的脱脂棉，供成虫食用，并将羽化后的20对雌雄成虫分别置于大塑料杯中，进行繁殖交配。另一部分的蛹则进行实验。文献综述

1．3  二点委夜蛾雌蛾性信息素的提取与含量测定

1．3．1  实验处理    将供试雌蛹置于塑料杯内，放入气候箱内。蛹开始羽化后逐日检查并更换塑料杯，使同日龄雌蛾处于同一塑料杯中。在3日龄暗期4～6 h时，进行性信息素提取。温度设20℃、25℃、30℃ 3个处理，一个气候箱内进行一个处理。每个处理测定15头雌蛾，分3次重复。气候箱的光周期为14L：10D，相对湿度为（60 ± 10）%。

1．3．2  性信息素的提取    本实验采用溶剂浸提法，所用溶剂为正己烷。待蛹羽化后，于3日龄暗期4～6 h采集处于求偶期的处女雌蛾。用手轻轻挤压雌蛾的腹部，迫使其完全伸出性信息素腺体，用手术剪将腺体剪下，放入预先装有1 ml正己烷的样品瓶中，每瓶2～6个腺体，样品瓶加盖密封后在室温下静止浸提20 min左右，将提取液进行过滤并放入干净的样品瓶中，冷藏保存备用。气象色谱分析之前经氮气浓缩至1 FE/μl。气象色谱带无分流进样装置，氢火焰离子化检测器，毛细管柱为HP-5（30 m×0。25 mm×0。2 μm）柱，进样量2 μl。升温程序为：起始温度80℃，保持1 min，然后以8℃/min的升温速率升至210℃，保持10分钟。进样室温度为220℃，检测室温度为280℃。氮气作载气，流速为1 ml/min。

1．3．3  单头雌蛾性信息素含量的测定    实验所采用的性信息素标准品Z7-12:OAc和Z9-14:OAc均由南京农业大学昆虫生理生化与分子生物学实验室提供。

性信息素组分与标准化合物保留时间相比较进行定性分析；性信息素组分与内标的气谱峰面积相比较进行定量分析。经计算（单头雌蛾性信息素含量=样品峰面积×标准品含量/（2×标准品峰面积））后即为单头雌蛾性信息素的含量。

1．4  二点委夜蛾雄蛾对信息素组分的触角电位反应

1．4．1  实验处理    将供试雄蛹置于塑料杯内，放入气候箱内。蛹开始羽化后逐日检查并更换塑料杯，使同日龄雄蛾处于同一塑料杯中。在3日龄暗期4～6 h时，进行EAG实验。温度设20℃、25℃、30℃ 3个处理，一个气候箱内进行一个处理。每个气候箱各处理测定9头雄蛾，分3次重复。气候箱的光周期为14L：10D，相对湿度为（60 ± 10）%。

1．4．2  触角电位反应    将处于3日龄暗期4～6 h的二点委夜蛾雄蛾触角用刀片从基部切下触角，再切掉触角顶端约0。5 mm。用导电胶将触角固定到电极上，并将电极固定到触角电位仪上，触角电位仪与EAG记录系统相连。将被测样品Z7-12:OAc、Z9-14:OAc两种组分配制成10 ng/μl、50 ng/μl、100 ng/μl等不同浓度，以正己烷为对照，每头成虫的触角对同一个样品剂量重复5次。每次将1 μl的测试样品均匀地滴在滤纸条（长2 cm，宽1 cm左右）上，待溶剂挥发约3 min后，迅速将滤纸条放置在巴斯德吸管中，并用封口膜封住巴斯德吸管的两端，静置30 min后，将吸管末端连接刺激气体控制装置。刺激顺序从低浓度到高浓度，刺激气体流量为20 ml/min，刺激时间为0。1 s，刺激间隔30 s,测定电压范围为5 mV。

1．5  数据处理来;自]优Y尔E论L文W网www.youerw.com +QQ752018766-

数据处理采用WPS Office(10。1。0）Excel软件进行统计分析。

2  结果与分析  温度对二点委夜蛾性信息素产生及感受的影响(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_96687.html