在过去的几十年中,已经开发出了几种从样品中提取目标化合物的分析方法。其中,基质固相分散 (MSPD) 在1989年首次由Barker引入。MSPD是一种高效的样品前处理技术,它将净化和提取过程合并在一起,具有分析方法迅速简洁,溶剂消耗量少等特点[ ]。其基本原理是将试样直接与适量萃取材料充分研磨,装柱,然后用洗脱剂淋洗。同时,作为简单高效的提取净化方法,MSPD在提出之后就广泛应用于提取动物组织、水果和蔬菜中的药物、除草剂、杀虫剂及其它污染物[ ]。因此MSPD提取方法的发展具有很大的前景。然而,传统的基质固相分散需要消耗大量的试剂和较长的萃取时间,并且可能会对环境造成严重的污染。因此,有必要开发用于测定植物中分析物的更高效基质固相分散方法。众所周知,固体吸附剂的吸附能力和选择性是MSPD提取成功的关键因素。此外,在该方法中使用的常见分散吸附剂是C18[ ],硅胶[ ],SBA -15和Florisil硅土。同时,据我们所知,通过基于β-环糊精的基质固相分散法同时提取植物样品中的酚酸类化合物尚未见报道。
环糊精 (CDs) 是圆锥形状的环状寡糖,具有“内部疏水,外部亲水”结构,其特有的空腔疏水可以选择性地将各种无机,有机和生物分子结合到它们的疏水空腔中形成超分子主体-客体复合物[ - ]。最常见的环糊精为分别包含六个,七个和八个葡萄糖单元的α-CD,β-CD和γ-CD。由于CDs具有低毒性,优异的吸附能力,良好的溶解性和特殊的化学性质等特征[ ],广泛应用于各种领域,如医药学[ ],手性分离[ ]和环境保护[ ]。
在我们的这项研究工作中,用β-CD作为MSPD的分散吸附剂,并且用超高效液相色谱-紫外检测法( UHPLC-UV )测定金银花中的酚酸类化合物。我们优化了MSPD提取方法的几个关键实验参数,如吸附剂种类,分散剂用量,研磨时间和洗脱溶。为了评价本方法的优势,和常规的超声辅助提取 (UAE),搅拌棒吸附萃取 (SBSE)[ ],微波辅助萃取 (MAE) 和固相萃取 (SPE)[ ] 等方法进行了比较。比较之下突出了本方法灵敏度高,选择性好,操作性简单的优势。最后,优化的方法用于金银花样品中酚酸类物质的提取和测定。
2。实验
2。1化学品和试剂
甲基-β-环糊精 (M-β-CD),2-羟丙基-β-环糊精 (HP-β-CD),β-CD,α-CD和γ-CD购买于东京化学工业公司 (日本,东京)。Florisil来自安谱科学仪器有限公司 (中国,上海)。C18由上海诚亚化工有限公司 (中国,上海)提供。色谱级甲醇,甲酸和乙腈来自西格玛化学品公司 (美国密苏里州,圣路易市)。分析级乙醇来自杭州化学试剂有限公司 (中国,杭州)。超纯水经Milli-Q系统制备。新绿原酸,绿原酸,3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸的分析标准品由上海融和医学技术有限公司 (中国,上海)提供。不同地区(杭州,安徽,山东)的金银花样品购买于当地超市 (中国,杭州)。酚酸类分析物的标准储备液 (100 μg/ mL) 在甲醇中制备,并在4 ℃下在黑暗中储存。
2。2 UAE过程
金银花的传统提取方法根据中国药典2010版进行。精确称量从杭州收集的金银花样品0。5 g,用50 mL甲醇-水 (50:50,v / v) 溶液溶解,并在室温下超声 (100 W,40 kHz) 萃取30分钟。萃取后,用甲醇-水 (50:50,v / v) 补偿失重。样品提取液通过0。22 μm一次性尼龙-66过滤器(安谱科学仪器有限公司,中国,上海)过滤。最后,将5 mL滤液转移到25 mL棕色容量瓶中,并在色谱分析前用甲醇-水 (50:50,v / v) 定容。论文网
2。3基质固相分散 (MSPD) 过程