(1)①可见分光光度计;②紫外分光光度计;③Strathtox活性污泥呼吸仪;④试剂瓶、容量瓶、烧杯、玻璃棒等。
(2)①无机盐溶液:KH2 PO4 0。054 g。L-1、MgSO4·7H2O 0。600 g L-1、CaCl2 0。272 g L-1、微量元素Ⅰ2。5 mL L-1、微量元素Ⅱ2。5 mL L-1;②模拟废水(10倍基质浓缩液):控制氨氮浓度为1g L-1,NaHCO3浓度为12 g L-1;③抑制剂溶液:苯酚浓度为12。5 mg。L-1;氯化铜、硫化钠浓度为200 mg L-1;罗红霉素浓度为500mg L-1;硫氰化钾的浓度为1000 mg L-1。④污泥取自实验室稳定运行的半短程硝化反应器,进水氨氮浓度980mgN L-1,出水NO2--N:NH4+-N控制在1。03-1。17之间,基本满足anammox反应对二者比例的需求。试验开始前测定SVI5以及SVI30。
2。2。1 单一抑制剂毒性实验
(1)对呼吸仪进行高低点校正,按表1加入试剂,测定呼吸速率。
(2)取容器中上清液3mL测三氮。氨氮、亚硝氮、硝氮分别采用苯酚-次氯酸盐分光光度法N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法和紫外分光光度法进行测定。过滤泥样测定VSS、SS。
表1 测定样品组成文献综述
组别(依据Cu(II)浓度分组)模拟废水(mL)无机盐溶液(mL)抑制剂浓度(mL)待测污泥(mL)
G0(对照0%)21008
G1(20%)2828
G2(40%)2648
G3(60%)2468
G4(80%)2288
G5(100%)20108
2。2。2 抑制剂对AOB/NOB作用实验
(1)对呼吸仪进行高低点校正。
(2)测定总的好氧速率(OUR)记为α,当DO浓度降低约3min后,向混合样中加进NaClO3同时控制体系中NaClO3的浓度为20 mmol L-1,测定OUR记为β。DO继续降低约3 min后,向混合样中加入ATU(丙烯基硫脲),控制其浓度为5 mg L-1,再测量OUR记为γ,α-β为NOB呼吸速率,β-γ为AOB呼吸速率。
2。2。3 组合抑制剂毒性测定
依据3。3。1试验结果,以对半短程硝化耗氧率抑制为25%,50%,75%时的抑制剂浓度作为试验浓度。以富集培养的活性污泥作为实验对象,测定在不同抑制剂组合影响下活性污泥的呼吸速率、VSS/SS及三氮转化率,测量方法如2。2。1。并利用相应软件计算抑制率、VSS/SS和氨氮转化率。
2。2。4 暴露实验
污泥与抑制剂作用时间的不同[6],以及暴露时有无基质都可能导致抑制作用的差异。选取2。2。3实验中SOUR为第2高的组合抑制剂为试验浓度,探究以上联合抑制对半短程硝化的抑制与暴露时间的关系。预设暴露时间为1h,2h,4h,暴露一定时间后测定各组对应的OUR(基质浓度控制为100mgL-1)以及测定(起始和)结束时的氨氮,亚硝氮,硝氮,计算亚硝氮积累率)。