GC-MS定量分析方法与色谱定量分析方法非常相似。从GC-MS分析方法获得的质谱图显示色谱峰的峰面积和相应组分的含量彼此成比例。如果定量测量某个组分,可以使用色谱方法中的归一化方法,外部标准方法,内部标准方法和其他不同的方法。茉莉花在开放释香的过程中,固定的香气组分变化显著,不适宜采用归一法定量,否则会导致结果的重现性差,香气化合物中的主要香气组分变化规律不显著。本实验采用内标法对茉莉花精油成分进行定量,内标法定量是目前香气分析中比较广泛采用的一种定量方法,它可以有效地减小实验误差,不仅如此,它的结果可比性强,而且操作在实验室简单易行。茉莉花香气分析中可采用壬酸甲醋作为内标物,该香气化合物在气象色谱-质谱分析茉莉花的谱图中不存在出峰时间,并且基本处于茉莉花香气气相色谱图中间位置,且与莱莉花香气组分不重叠。GC-MS分析选用质量色谱图进行定量,能够非常有效的消除其他组分的干扰,例如溶剂等。为了进一步提高检测灵敏度和减少其他成分的干扰,质谱仪通常通过GC-MS定量分析中的离子扫描进行选择。
根据茉莉花香精香气成分定性、定量数据,模拟制备茉莉花香气成分溶液(花香、果香、青香、木香、药香等)。
2.1.2茉莉花香气物质协同作用
(1)香气协同S曲线法
在对香气物质进行定性定量之后,为了研究香气成分之间的协同作用,将茉莉精油中的香气物质进行香韵分类,主要包括花香香韵、果香香韵、青香香韵、木香香韵和药香韵。S曲线法是通过实测阈值与理论阈值之比来判定香气成分之间的相互作用。香气成分的阈值采用频率法测定,选取16名感官评价人员组成小组,其中包括8名男性和8名女性,年龄均在21-28岁之间,小组人员采用三点选配法(3AFC)测试方法,其中稀释因子设为2,来测定香气成分的阈值。共稀释出10个浓度梯度,最高点的浓度取自预实验,每个浓度点均设三个样品,其中两个空白样为溶剂样品,一个为香气物质样品。小组成员从最高浓度依次开始嗅闻,最后统计同一浓度下嗅闻出所含香气物质样品的人数计算出该浓度的检测概率。其中检测概率为该浓度下嗅闻出含有香气物质样品的人数与嗅闻样品的总人数之比。因三点选配法存在实验随机误差。误差来源可能是小组成员,也有可能是实验室不可控因素。所以检测概率需要同校正公式结合计算,其中校正公式为:
P*=(3P-1)/2 (2.1)
(其中P*为检测概率的校正值,P为实测的检测概率值)。
将香气物质分类后的香韵以实际浓度比进行两两混合,用同样的方法测定混合物的检测概率。每次实验重复三次取平均值,最后将实验所得数据采用 sigma plot软件绘制成曲线并计算其阈值。因本次实验主要研究香韵之间的协同作用,所以主要测定单个香韵的阈值与二元混合香韵的阈值。其计算检测概率公式为: