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亚硝酸盐还原酶发酵工艺研究(9)
3.1.2 培养基氮源的研究
(1)硝酸钠+酵母膏
将菌体接种到200mL硝酸钠10g+酵母膏5g培养基中。37℃恒温培养6h后加入NaNO2,继续培养18h取样,以等量的蒸馏水代替样品,做空白对照,在538nm下测其吸光值。以NaNO2浓度为横坐标,NaNO2降解量为纵坐标,绘制降解图。
亚硝酸钠降解量如下:
图3.3 硝酸钠10g+酵母膏5g中亚硝酸钠降解量
如图3.3所示,当培养基为硝酸钠10g+酵母膏5g时,根据不同终浓度亚硝酸钠,降解量呈现先升后降的趋势,当终浓度为150µg/mL时,降解量最高,即33.89µg/mL,当终浓度大于150µg/mL时,降解量有所下降且趋势逐渐平缓。
(2)硝酸钠+酵母
将菌体接种到200mL硝酸钠15g+酵母膏5g培养基中。37℃恒温培养6h后加入NaNO2,继续培养18h取样,以等量的蒸馏水代替样品,做空白对照,在538nm下测其吸光值。以NaNO2浓度为横坐标,NaNO2降解量为纵坐标,绘制降解图。
亚硝酸钠降解量如下:
图3.4 硝酸钠15g+酵母膏5g中亚硝酸钠降解量
如图3.4所示,当培养基为硝酸钠15g+酵母膏5g时,根据不同终浓度亚硝酸钠,降解量呈现先升后降的趋势,当终浓度为150µg/mL时,降解量最高,即34.25µg/mL,当终浓度大于150µg/mL时,降解量呈现继续下降趋势。
(3)不同质量硫酸铵+酵母膏5g
将菌体接种到200mL硫酸铵10g+酵母膏5g和硫酸铵15g+酵母膏5g的培养基中。37℃恒温培养6h后加入NaNO2,继续培养18h取样,以等量的蒸馏水代替样品,做空白对照,在538nm下测其吸光值。以NaNO2浓度为横坐标,NaNO2降解量为纵坐标,绘制降解图。
亚硝酸钠降解量如下:
图3.5 不同硫酸铵中亚硝酸钠降解量
如图3.5所示,当培养基中硫酸铵克数越高时,亚硝酸钠降解量越高,当硫酸铵15g是,降解量为16.14µg/mL,而硫酸铵10g时的降解幅度为15.09µg/mL,有此可得的结论为硫酸铵质量越高,亚硝酸钠降解量越高。
3.1.3 培养基氮源的优化研究
(1)硝酸钠+不同质量酵母膏
分别配制酵母膏为1g、3g、5g、7g、9g的培养基,接种后培养6h后加入终浓度200µg/mLNaNO2,继续培养18h后测定538nm下吸光度值。以酵母膏克数为横坐标,NaNO2降解量为纵坐标,绘制降解图。
亚硝酸钠降解量如图3.6所示:
图 3.6 硝酸钠+不同克数酵母膏中亚硝酸盐降解图
如图3.6所示,亚硝酸钠在不同质量酵母膏中培养18h后,降解效果差异明显,当酵母膏质量为9g是,降解量达到最高,为59.16µg/mL,而酵母膏质量为3g时,降解效果最差,为14.60µg/mL,由此可见,酵母膏克数越高,亚硝酸钠降解效果越好。
(2)硫酸铵+不同质量酵母膏
分别配制酵母膏为1g、3g、5g、7g、9g的培养基,接种后培养6h后加入终浓度200µg/mLNaNO2,继续培养18h后测定538nm下吸光度值。以酵母膏克数为横坐标,NaNO2降解量为纵坐标,绘制降解图。
亚硝酸钠降解量如图3.7所示:
图 3.7 硫酸铵+不同克数酵母膏中亚硝酸盐降解图
如图3.7所示,亚硝酸钠在不同质量酵母膏中培养18h后,降解效果呈现先升后降的趋势,当酵母膏分别为1g、3g、5g时,降解量差别不大,当酵母膏质量为7g时,降解量达到最高,为66.18µg/mL,而酵母膏质量为9g时,降解量略有下降,为58.81µg/mL。
3.1.4 不同加样时间对降解亚硝酸钠的测定
(1)硝酸钠+酵母膏
将加了菌的培养基分别培养1h、2h、4h、6h、8h后加入200µg/mL NaNO2,继续培养23h后取出,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度。以加样时间为横坐标,NaNO2降解量为纵坐标,绘制降解图。
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