摘要叶色突变在高等植物中是一种很常见的性状突变，主要表现在叶片颜色的变异，因其大多数能在苗期直接观察，可作为一种标记性状，对植物光合作用、叶绿体发育以及遗传育种等具有较高的研究价值。我们通过EMS诱变分离得到了一个黄叶突变体yl2，在整个生长过程中表现出叶片黄化；与野生型相比较，突变体yl2植株的叶绿素含量下降，荧光参数发生异常，叶绿体结构发育不完全，光合能力下降。在yl2突变体中，光系统II（PSII）参数较野生型明显降低。通过图位克隆的方法，将YL2基因限定到193kb区间内，该区间共有50个ORFs。通过测序分析，发现其中一个ORF的非编码区发生单核苷酸突变，使mRNA产生错误剪切生成新的剪切识别位点，造成蛋白的保守性序列缺失，同时导致突变体中该基因的表达量下降。88117

Abstract

The leaf color mutation in higher plants is a very common mutation characters, mainly in the leaf color variation, because most of its can be directly observed in the seedling stage, can be used as a marker, has high research value on plant photosynthesis, chloroplast development and genetic breeding。 In this study, we isolated a yellow leaf mutant yl2 from rice through EMS mutagenesis。 Compared with the wild type, yl2 mutant showed yellow leaf throughout the entire growing period and the reduced chlorophyll contents in yl2 mutant is consistant with its yellow color phenotype。 The development of chloroplast was severely delayed and fluorescence parameters, especially in PSII, changed significantly in yl2 mutant, indicating that YL2 may be involved in chloroplast development and PSII regulation。 Through map-based cloning method, we delimited YL2 gene into a 193kb region and found a single base mutation on the fifth exon-intron bountry base, which lead to produce a new splicing site upstream of the mutation base and cause a 19 amino acids deletion finally。

毕业论文关键词：水稻；YL2基因；图位克隆From~优E尔L论E文W网wWw.YoUeRw.com 加QQ7520.18766

Keyword: rice；YL2；map-based cloning

目    录

2、水稻突变体YL2的生理学以及光合特性的研究 4

2。1实验材料 4

2。1。1材料 4

2。1。2试剂 4

2。2实验方法 5

2。2。1水稻叶绿素含量测定 5

2。2。2光合参数的测定 5

2。3结果与分析 5

2。3。1水稻突变体yl2形态学的分析 5

2。3。2突变体yl2与野生型材料的叶绿素含量差异 7

2。3。3光合相关参数的测定 8

2。4 讨论与小结 9

3、YL2 基因的图位克隆和功能互补 10

3。1 实验材料 10

3。1。1 材料 10

3。1。2 试剂 10

3。2 实验方法 10

3。2。1 水稻基因组 DNA 的提取 10

3。2。2 PCR 反应和分子标记多态性筛选 11

3。2。3 突变基因的分子定位和引物设计 11

3。2。4 候选基因的预测及鉴定 12

3。2。5 功能互补载体构建 12