壳聚糖-果香型精油涂膜的抑菌效果及效构关系研究(7)
每个处理取2个样品。放入粉碎机打碎后用纱布过滤出橙汁，打开折光仪盖板，用纱布或卷纸将镜面擦拭干净，然后再棱镜玻璃面上滴加2-3滴橙汁，盖上盖板后水平观察，读取实业中明暗交界线上的刻度，即为果蔬汁中可溶性固形物含量（%），实验重复一次。
2.3数据统计分析与作图
本课题所有实验数据均使用SAS数学统计软件（SAS Institute, version 8.0,Cary,NC）中的ANOVA方法（邓肯氏差异分析方法，p<0.05）
3分析与讨论
3.1蒸馏型桔子油和冷榨型桔子油的体外（in vitro）抑菌效果
在PDA培养基中分别加入100、500、1000、1500、2000、2500μl/L的蒸馏型、冷榨型桔子精油后，接种P.italicum,放入28℃恒温培养箱培养4天和7天后统计菌落直径，结果分别如表2和表3，不同的浓度的蒸馏型、冷榨型桔子精油对P.italicum均具有一定的抑菌效果，浓度越高，菌落直径越小。并且冷榨型精油比蒸馏型精油具有更好的抑制效果。
表2 第4天蒸馏型桔子精油和冷榨型桔子精油对P.italicum的直接接触抑制效果
Table 1 Effects of two types of orange oil on P.italicum (in vitro) at the 4th day
Concentration/
μl/L
Diameter
/cm
蒸馏型桔子精油 冷榨型桔子精油0
2.25±0.21a
100 2.05±0.64ab 2.13±0.12ab
500 1.90±0.17ab 1.93±0.21ab
1000 1.90±0.10ab 1.80±0.28ab
1500 1.77±0.06ab 1.85±0.07ab
2000 1.80±0.26ab 1.70±0.14b
2500 1.57±0.21b 1.20±0.26c
蒸馏型桔子精油抑制效果最好的处理是2500μl/L，培养后的菌落直径与对照相比减少了0.68cm；冷榨型桔子精油抑制效果最好的处理为2500μl/L，培养后的菌落直径与对照相比减少了1.05cm，当精油浓度降低到100μl/L时，抑菌效果减小，但与对照相比，仍有显著的抑菌效果（p<0.05）。
表3 第7天蒸馏型桔子精油和冷榨型桔子精油对P.italicum的直接接触抑制效果
Table 2 Effects of two types of orange oil on P.italicum (in vitro) at the 7th day
Concentration/
μl/L
Diameter
/cm
蒸馏型桔子精油 冷榨型桔子精油
0 9.00±0.00a
100 9.00±0.00a 9.00±0.00a
500 8.67±0.29a 8.27±0.25ab
1000 8.03±0.15b 7.40±0.46b
1500 6.20±0.17c 5.30±0.36c
2000 5.73±0.25d 4.60±0.53c
2500
4.37±0.12e 3.43±0.31d
表2和表3中的字母表示不同处理之间的差异性（p<0.05）
蒸馏型桔子精油抑制效果最好的处理是2000μl/L和2500μl/L，培养后的菌落直径与对照相比分别减少了3.27cm和4.63cm；冷榨型桔子精油抑制效果最好的处理为2000μl/L 和2500μl/L，培养后的菌落直径与对照相比分别减少了4.40cm和5.57cm，当精油浓度降低到1000μl/L时，抑菌效果减小，但与对照相比，仍有显著的抑菌效果（p<0.05）。
P.italicum是橙子贮藏期间青霉病的致病菌，根据表2和表3的结果，后续试验选择橙子作为研究对象，并选择1000μl/L的精油浓度进行果实上的试验。
3.2 植物精油、壳聚糖以及壳聚糖植物精油的结合处理对意大利青霉的影响
将品相完好大小均一的橙子洗净、晾干，在橙子表面打孔并接种P.italicum，室温下培养5天后统计其菌落直径并计算抑制率。结果如图1所示。图（a）为各个处理对P.italicum平均病斑直径的影响，从图中我们可以看到不同处理与对照相比均有显著的降低橙子&&病发病率的效果。壳聚糖与精油结合处理形成的涂膜比单一处理效果好，其中1%壳聚糖+1000μl/L冷榨型桔子精油的平均直径为0.76cm,抑制效果最为明显。并且，不论是单一处理还是结合处理中，含有冷榨型桔子精油的处理比含有蒸馏型桔子精油的效果要好。图（b）显示了各个处理对P.italicum发病率的影响，发病率规律与病斑直径规律相似，其中效果最好的为1%壳聚糖+1000μl/L冷榨型桔子精油和1%壳聚糖+1000μl/L蒸馏型桔子精油，发病率均在40%左右。