2。2黑斑蛙精子指标的测定文献综述
将暴露后的精巢放置在离心管中,根据质量体积比加入PBS,用眼科小剪剪碎精巢组织,混匀制成精子混悬液,为测以下指标做准备。
1)精子数量:取20µl精子取悬浮液于血球计数板,覆以盖玻片,静置 2分钟按红细胞计数法在高倍镜(400×)计数精子总数:计数四个方格内精子数,记为 A1,A2,A3,A4,然后公式(A1+A2+A3+A4)/100×4×106=精子总数(个/ml)。一滴悬浮液中所含的精子数/滴悬浮液的体积。
2)精子活性:取一滴精子悬液充入血球计数板内,静置 2min,在高倍镜下(×400)下记录不同活动等级的精子数,每只黑蛙蛙分析100个精子,精子活动能力标准标准如下:快速直线运动为活动良好(a);运动活泼但方向不定,不成直线运动为活性一般(b);精子运动迟缓,原地转动或摆动,为活动不良(c);原地静止不动,为不活动(d)。精
子活动率:η =( a+b+c)(a+b+c+d)。