1.2β-葡聚糖概述
葡聚糖是由单分子葡萄糖聚合而成的一类多糖高分子物质,广泛存在于高等植物、动物等体内,也可以通过微生物合成,有两种类型分别是α和β。其中α型葡聚糖主要存在于一些微生物发酵过程中产生的黏液中[5]。目前对酵母β-葡聚糖的研究最深入。
酵母细胞壁干物质积累量的40%-60%左右都是β-葡聚糖[6]。β-葡聚糖是一种优良的生物活性调节剂,具有抗辐射、抗肿瘤、改善肠道健康、低胆固醇和血脂、抗氧化、增强免疫力等生理活性。同时由于β-葡聚糖具有高粘性、生物活性高、高持水性、热量低、和热稳定性等特点,可作为功能因子、脂肪替代品和膳食纤维等广泛应用于医药、食品、化妆品、建筑材料等领域[7,8]。
酵母β-葡聚糖是维持细胞壁机械结构的一种结构多糖,它的主要生理功能是保持细胞正常的生理形态[9]。β-葡聚糖是一种纤维三糖或四糖片段,是β-D-吡喃型葡萄糖基单元被β-(1→4)-糖苷键重复连接形成。同时含有5-14个葡萄糖残基的纤维素寡聚物,这些纤维素寡聚物再通过单一的β-(1→3)-糖苷键连接组合,形成线型同聚多糖[10]。
1.3β-葡聚糖的提取方法研究
酵母β-葡聚糖的分子结构和分子量会受到不同提取工艺方法的影响,且相差很大。提取酵母β-葡聚糖最先出现的方法就是酸法提取。酸法提取获得的酵母β-葡聚糖得率高,但得到的β-葡聚糖纯度都较低,但会有数量不低的甘露糖和蛋白质出现,很难应用在大型制药。碱法提取获得的酵母β-葡聚糖杂质含量低,但得率也相对较低,仅适用于食品及药物等对β-葡聚糖纯度要求较高的情况。酸法碱法提取中会使用到强酸、强碱,通过强酸强碱的反复作用来提取酵母β-葡聚糖,这两种方法中试剂使用量很大、非常耗费时间且提取到的酵母β-葡聚糖中含有大量杂质并且污染环境。Izydorczyk等[11]采用热水法从大麦中提取得到了β-葡聚糖,发现60℃相比于40℃水溶液提取的β-葡聚糖具有更小的摩尔质量。超声波辅助提取β-葡聚糖的操作工艺简单,时间短效率高,对基本对环境不造成污染,虽然得到的β-葡聚糖纯度不高,蛋白质含量相对较高,但是超声波辅助法可以和酸碱法、酶法等同时使用,提高酵母β-葡聚糖的产量和纯度。自溶-酶碱法提取β-葡聚糖的得率高蛋白质含量低、纯度相对较高,且保存了酵母β-葡聚糖本身的生物活性,操作工艺简单、对环境污染很小,有利于广泛应用及生产。
现在常用酵母β-葡聚糖的提取方法有酸法、碱法、水提法、超声波辅助法、自溶-酶
-碱法等。
表1.1常用β-葡聚糖提取方法优缺点
提取方法 优点 缺点
酸法
得率高 纯度低、多糖降解、试剂使用量大、耗费时间、污染环境
碱法
纯度高 得率低、部分多糖降解、试剂使用量大、耗费时间、污染环境
水提法 获得β-葡聚糖完整 得率低
超声波辅助法 效率高、制备时间短 纯度低,难以工业化
自溶-酶-碱法 得率高、纯度高 工艺复杂