地塞米松对果蝇抗热胁迫及生殖能力的影响(2)
该实验的研究背景是：在已知地塞米松属于糖皮质类激素是一种人工合成的激素，类属于类固醇类药物[1]。具有抗内毒素、抗过敏、抗自身免疫性疾病和抗炎等作用[1,2]，DXM的主要作用是危重疾病的急救用药同时还是各种炎症的治疗药物[3]以及地塞米松的药理机制和副作用下的背景下，探究其在高温下对果蝇寿命的影响和常温下对其生长发育的影响。
研究意义：期望对未来研究动物生长发育及寿命方面（如衰老、睡眠等）提供一定的数据基础和实验证明。
地塞米松对小鼠免疫系统的抑制试验证明地塞米松可引起淋巴细胞、脾脏和胸腺不同程度的凋亡，因此对免疫系统有着非常明显的抑制作用[4-7]。DXM对动物的生殖能力和寿命有哪些作用我们还不是很了解。近年来DXM药理的研究受到重视，一般用果蝇做实验材料来研究一种新药的药理机制是因为果蝇是一种双翅目昆虫[8, 9]，其生长周期较短，便于饲养，生长繁殖快，染色体少只有四对，染色体数量不仅少而且它们的形状有着明显的差异[9, 10]。果蝇性状的变异有很多种，如果蝇眼睛颜色的突变、身体的颜色等性状都有多种变异，果蝇的这些特点对于遗传学方面的研究提供了便利[10]。果蝇是一种模型动物[9]，它的各方面的优点为药理的研究提供很大的方便。该实验是用果蝇作为实验材料，研究不同浓度的DXM对果蝇的生长发育及寿命的影响[12]，期望对未来研究动物生长发育及寿命方面[13](如衰老、睡眠等）提供一定的数据基础和实验证明[10, 11]。
1实验材料和方法
1.1 实验试剂和仪器
1.1.1试剂：
DXM、玉米粉（食品级）、蔗糖（分析纯）、活性酵母（食品级），酵母浸粉为国产生物试剂由北京奥博星生物技术有限公司提供，琼脂粉为国产生化试剂，丙酸为国产分析纯，均由天津市科密欧化学试剂有限公司提供，乙醚由开封市方晶化学试剂有限公司提供。
1.1.2仪器：
AR423CN型电子天平产自上海奥豪斯仪器有限公司；
巩义市予华仪器有限责任公司提供的玻璃仪器气流烘干器；
北京市永光明医疗仪器厂提供电子万用炉；
郑州生元仪器有限公司生产的DHG－2150B型电热鼓风干燥箱；
郑州生元仪器有限公司生产的MGC－350型智能型光照培养箱；
电子显微镜型号为：CX21FS1.由菲律宾制造；
1000ml量筒、烧杯（50ml、1000ml等）、玻璃棒、胶头滴管；
1.2果蝇类型
收集用香蕉皮引诱的野生型果蝇，同时把一些果蝇放在空白培养基中进行同步化为做生长发育实验提供材料，将其羽化后而还没有发生交配的雌雄果蝇分开各半。寿命试验直接用抓到的野生果蝇即可，选择外观正常大小相似的果蝇每20只一组进行实验。
1.3实验方法
1.3.1培养基的配置
基础培养基的配配制：配置1000g培养基，称取蔗糖65g,琼脂7.5g，水1000ml，称取15g酵母粉，玉米粉85g先放入500ml水中搅拌均匀，将称量好的试剂加入500ml沸水中。等到温度降到50-60℃左右时，加入5ml丙酸充分搅拌即配成基础培养基。将称量好的DXM（0.002g，0.02g,0.2g）加入到配置好的基础培养基中，充分搅拌后将其装到干净的培养瓶中，每瓶约为66g,放在一旁冷却后使用，最后形成的浓度梯度是（大剂量组1mg/g、中剂量组0.1mg/g、0.01mg/g）。每个DXM浓度的培养基要有三个重复，空白对照也要有三个重复。培养条件：生殖发育的条件为常温下即可（26℃），寿命实验的条件为恒温箱中30℃培养。
1.3.2高温下果蝇寿命受DXM影响的测定
用塑料袋收集室外用香蕉皮引诱的野生型果蝇，把收集到的果蝇先转到空瓶中，然后用乙醚麻醉转移后的果蝇，放在盛有培养基（含有不同浓度地塞米松）的培养瓶中，每瓶培养基中放入20只大小和外观相似的果蝇且不分辨雌雄。用基础培养基作为对照组饲喂果蝇（其中放入和实验组一样的果蝇），每组设置3个平行试验，把盛有果蝇的培养瓶放在30℃的恒温箱中培养，设为自然光照周期。每天在同一时间（约16点左右）记录存活果蝇的个数，直到果蝇全部死亡。在统计存活果蝇要把麻醉过度和粘在培养基上的因意外而造成死亡以及飞跑的果蝇数去除，不在计数内。果蝇的数量死亡一半时天数即为半数死亡天数。所有的果蝇存活总天数的平均数为果蝇的平均寿命，并统计果蝇的平均最长寿命（最后2只死亡果蝇的生存天数平均值）。