苯嘧磺草胺对野生大豆生长影响及噻二唑衍生物的作用研究(2)
1材料与方法
1.1试验材料
试验所用到的野生大豆种子为ZS（周口公园中采到）。
试验所用苯嘧磺草胺的中文名称为：N-[2-氯-4-氟-5-(3-甲基-2,6-二氧-4-（三氟甲基）-3,6-二氢-1（2H）-嘧啶)苯甲酰]-N-异丙基-N-甲基硫酰胺；英文名称：N'-[{2-chlcro-4-fluoro-5-[1,2,3,6-tetrahydro-3-methyl-2,6-dioxo-4-(trifluoromothyl)pyrlmidin-1-yl]benzoyl}-n-isopropyl-n-methylsul-famide
试验所用的噻二唑衍生物中文名称为：N-[5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基]-N'-4-硝基苯甲酰基脲；英文名称：N-[5- (4-Chlorophenyl )-1,3,4-Thiadiazole -2-yl]-N '-4-Nitrobenzoyl Urea（TNU）；分子结构式：
由周口师范学院化学化工学院有机化学实验室合成并提供。
1.2试验方法
1.2.1材料处理
取粒大饱满的野生大豆种子，36℃蒸馏水浸泡24h，用浓硫酸处理野生大豆种子5-7min，脱去野生大豆外面坚硬的种皮，处理完毕后用清水冲洗6-7次，直到硫酸洗净为止，置36℃恒温箱中浸泡24h催芽。挑出露白一致的种子，均匀播种于盛满沙子的300×200×50mm的托盘中，每盘60粒，播种12盘，每2盘为一组，分别用CK1、CK2、T1、T2、T3、T4标记。每天定时浇灌50mL的MS营养液，在温度为25℃、光照度为4000lx环境中培养，每天光照12h。待幼苗长出4片真叶后，用10mg/L的TNU处理CK2组的野生大豆幼苗，用20g/L的苯嘧磺草胺处理T1、T2、T3、T4组野生大豆幼苗，两天处理一次，共处理6天。待幼苗长出6个叶片时，用0mg/L的TNU处理T1组野生大豆幼苗，5mg/L的TNU处理T2组野生大豆幼苗，10mg/L的TNU处理T3组野生大豆幼苗，15mg/L的TNU处理T4组野生大豆幼苗，每5天叶面喷施一次，培养两周后进行相关生理指标测定。以去离子水培养的野生大豆幼苗作为对照（CK1）。
1.2.2 测定项目与方法
形态指标测定：随机取野生大豆幼苗，用直尺测量苗高，用分析天平测定鲜重。
生理指标测定：取野生大豆的幼苗叶片进行测定，采用酸性茚三酮法测定游离脯氨酸含量[11]；采用乙醇浸提法测定叶绿素含量[11]；采用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量[11]；采用硫酸巴比妥酸法测定MDA含量[11]。
1.3数据分析
对实验测得的数据采用SPSS和Microsoft Excel 2003统计分析软件进行数据分析与处理。
2结果与分析
2.1 TNU对苯嘧磺草胺胁迫下野生大豆幼苗苗高的影响
由图1可知，正常条件下生长的野生大豆幼苗苗高为10.02cm，正常条件下用10mg/L的N-[5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基]-N’-4-硝基苯甲酰基脲处理后（CK2），野生大豆幼苗苗高与CK1处理相比增加了5.99%，增加效果差异不显著。苯嘧磺草胺胁迫条件下，野生大豆幼苗苗高（T1处理）与CK1相比降低了23.75%，降低效果达到极显著差异水平（P<0.01），经过不同浓度的N-[5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基]-N’-4-硝基苯甲酰基脲处理后，野生大豆幼苗苗高随处理浓度呈现先增加而后略又降低的趋势，与T1处理相比分别增加了21.20%、26.17%、25.39%。说明一定浓度的N-[5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基]-N’-4-硝基苯甲酰基脲处理可以降低苯嘧磺草胺胁迫对野生大豆幼苗的伤害作用。
2.2 TNU对苯嘧磺草胺胁迫下野生大豆幼苗苗鲜重的影响
图2表明，正常条件下生长的野生大豆幼苗苗鲜重为0.109g，正常条件下用10mg/L的N-[5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基]-N’-4-硝基苯甲酰基脲处理后（CK2），野生大豆幼苗苗鲜重与CK1处理相比增加了4.60%，增加效果达显著差异水平（P<0.05）。苯嘧磺草胺胁迫条件下，野生大豆幼苗苗鲜重（T1处理）与CK1相比降低了20.18%，降低效果达到极显著差异水平（P<0.01），经过不同浓度的N-[5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基]-N’-4-硝基苯甲酰基脲处理后，野生大豆幼苗鲜重随处理浓度呈现先增加而后略又降低的趋势，与T1处理相比分别增加了8.06%、18.39%、13.79%，增加效果均达到极显著差异水平（P<0.01）。说明一定浓度的N-[5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基]-N’-4-硝基苯甲酰基脲处理可以增加野生大豆幼苗的鲜重，其中10mg/L TNU缓解唑嘧磺草胺胁迫效果最好。