水杨酸对酸浆种子萌发及幼苗生长的影响(2)
水杨酸(Salicylic Acid，SA)是植物体内普遍存在的一类小分子酚类化合物，化学名称为邻羟基苯甲酸，能够参与植物细胞信号传导，不仅能作为激活植物抗性反应的信号分子调控相关基因表达提高植物抗性，还能影响植物的种子萌发、生长、开花、气孔关闭、离子吸收与转运、细胞膜透性、光合作用及生长速率等一系列生理生化过程[4]。水杨酸还能提高植物对环境胁迫的抗性，如缓解重金属对植物的毒害作用[5]，提高植物抗旱性、抗盐性、加快种子萌发速度等[6-9]。目前在促进种子萌发及幼苗生长这方面的研究多见于水稻、瓜和豆类等作物中[10]，但对酸浆却尚未见报道。该实验以酸浆为研究对象，旨在探讨水杨酸在酸浆形成过程中的生理功能及作用机理，寻找提高酸浆产量的方法，为酸浆培养者提供指导，并为水杨酸在农业上的应用提供理论依据。
1材料与方法
1.1实验材料
本实验所用的材料为酸浆种子，由周口师范学院植物遗传与分子育种重点实验室提供。水杨酸购买于天津市津化化学试剂厂。
1.2实验方法
取粒大饱满的野生酸浆种子，用0.1%HgCl2表面消毒7 min，然后在30℃的去离子水中浸泡。将浸泡过的种子均匀放在铺有两层滤纸和纱布的90mm的培养皿中，每皿100粒，播种18皿。将培养皿放在光照培养箱中培养，在恒温25℃，光照度4000-4500lx，光/暗周期为14h/10h的培养室中培养。每天定点用20 mL处理液处理，使纱布保持湿润。处理液为不同浓度的（0、10、20、30、40、50mg/L）水杨酸溶液，每个浓度重复3次，培养10d后开始进行相关指标测定。所有实验均在周口师范学院生命科学与农学学院植物生理实验室完成。
1.3 测定项目与方法
1.3.1种子萌发指标和幼苗生长指标的测定
从种子开始萌发到第10d发芽基本结束为止，每天统计发芽数（以胚芽长度达到种子1/2为种子发芽的判断标准），发芽实验结束后（第10d）各处理随机取10株幼苗分别测量其根长、茎高、根粗与茎粗。按下列公式计算发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数。
发芽率（GR）=Gt/T×100%
发芽势（GP）= Gt/T×100%
发芽指数（GI）=∑Gt/Dt
活力指数（VI）=S×GI
式中Gt为在t日内的发芽量（其中，发芽率为第10d统计结果，发芽势为第3d统计结果）；Dt为相应的发芽天数；T为种子总数；S为发芽第10d酸浆单株平均芽长。根长和茎高：酸浆取样后用直尺测量；根粗与茎粗：酸浆取样后用游标卡尺测量。
1.3.2生理指标的测定
培养10d后随即取酸浆幼苗的根尖和完全展开叶，去离子水反复冲洗，用考马斯亮蓝G-250法测定酸浆幼苗叶片中的可溶性蛋白含量[11]；蒽酮比色法测定酸浆幼苗叶片的可溶性糖含量[12]；丙酮-乙醇浸提法测定酸浆幼苗叶片中的叶绿素含量[13]；磺胺比色法测定酸浆幼苗叶片的硝酸还原酶含量[11] ；氯化三苯基四氮唑（TTC）法测定酸浆幼苗根系活力[12 ]。
1.4 数据分析
以上所有数据均取3次重复平均值，采用Microsoft Excel 2003和SPSS 10.0统计分析软件进行数据分析和差异显著性检验。
2结果与分析
2.1 SA处理对酸浆种子发芽特性的影响
植物种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数是植物种子萌发的重要指标，衡量植物的萌发情况。实验结果如表1所示，外施不同浓度的SA后，酸浆种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数均有所增加，酸浆幼苗的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数均呈先增加后下降的趋势。与0mmol/LSA相比，发芽率分别增加了17.88%、64.24%、85.57%、81.73%、76.62%，发芽势分别增加了22.65%、38.51%、90.94%、75.88%、60.02%，发芽指数分别增加了2.91%、6.60%、12.27%、10.12%、8.74%，活力指数分别增加了15.89%、46.68%、95.74%、59.07%、50.31%。以上数据说明，不同浓度SA处理后，酸浆种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数均有所增加，发芽率、发芽势和活力指数的增加显著（P<0.05)，在所有浓度中，以添加30 mg/LSA处理效果最佳。