烯草酮在马铃薯和土壤上分布研究(6)
回旋振荡器 HY-5 Z-67 常州祥天实验仪器厂
超声波清洗仪 YCQ-300 Z-77 上海凯波超声设备有限公司
纯水仪 PURELAB Maxima Z-203 ELGA
2.2 分析步骤
2.2.1 提取
准确称取马铃薯或者土壤样品5.00 g，置于具塞锥形瓶中。加入20.0 mL超纯水，2.0 mL乙酸铅，加入20.0 mL乙腈，在摇床上摇晃2 h后抽滤，滤液收集到5~7 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，盖上塞子，剧烈振荡1 min，在室温下静置10 min，使乙腈相和水相分层。
2.2.2 净化
在小离心管中称取C18填料30 mg，取1 mL提取液加入离心管，在涡旋仪上涡旋30 s，然后放入离心机离心。10000 r/min，离心5 min.离心完后取出离心管，将上层清液用0.22 μm微孔滤膜过滤，装入进样小瓶待上机。
2.2.3 测定
分别吸取4 μL标准溶液和待测液注入仪器中，以保留时间以及离子对360.1/240.6与360.1/164.1进行定性分析，离子对360.1/164.1作为定量离子（其响应值相对较高）。
2.2.3.1 仪器条件
液相条件：
a) 色谱柱： C18（2.1×50 mm，2.7 µm），或相当者；
b) 流动相：乙腈-水-甲酸(体积比60∶40∶0.1)；
c) 流速：0.3 mL/min；
d) 柱温：35℃；
e) 进样量：4 µL。
质谱条件：
a) 离子源：电喷雾ESI源；
b) 检测方式：多反应监测模式(MRM)；
c) 雾化器：氮气；
c) 压力：172 kPa；
d) 干燥气：氮气；
e) 流速：10 L/min;
f) 雾化温度：350 ℃；
g）碰撞气：氮气；
h）选择母离子m/z 360.1，子离子m/z 164.1(碰撞能量CE 14 V)和m/z 240.6(碰撞能量CE 10 V)
2.2.3.2 结果的计算和表达
试样中分析物的含量以质量分数W表示，单位为毫克每千克（mg/kg）,按公式（1）计算：
..（1）
式中：
ω——标准溶液中农药的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；
A—— 样品溶液中被测农药的峰面积；
AS——农药标准溶液中被测农药的峰面积；
V1——提取溶剂总体积，单位为毫升（mL）；
V2——吸取出用于检测的提取溶液的体积，单位为毫升（mL）；
V3——样品溶液定容体积，单位为毫升（mL）；
m——试样的质量，单位为克（g）。
计算结果保留两位有效数字，当结果大于1 mg/kg时保留三位有效数字。
2.3标准曲线与检出限
2.3.1.标准曲线
配置了0.005，0.01，0.02，0.05，0.1，0.2，0.5 mg•kg-17种不同浓度的烯草酮标样，进行上机，做标准曲线。离子对360.1/164.1作为定量离子。
数据见表2-2，处理如下图2-1.
表2-2.烯草酮各浓度的峰面积
浓度/mg•kg-1 峰面积
0.005 39692
0.01 83596
0.02 136382
0.05 340677
0.1 668761
0.2 1384867
0.5 3387286
图2-1 烯草酮标准样品标准曲线
2.3.2检出限与定量限
配置浓度为0.05，0.02，0.01，0.005，0.001，0.0005 mg•kg-1的烯草酮标准品，进行上机，研究该方法的检出限与定量限，离子对360.1/164.1作为定量离子，其数据见表2-2，相关色谱图见图2-3至2-5.
表 2-3 烯草酮标准品的配置浓度与仪器实测浓度
浓度/mg•kg-1 实测浓度/mg•kg-1
0.05 0.052
0.02 0.018
0.01 0.011
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