多种水果中多酚含量的检测及实验比较(8)
765 1.041 1.043
770 1.037 1.041
图1显示，采用不同溶剂溶解没食子酸标准品对显色的影响并不大。我们都知道丙酮极具挥发性和刺激性，因此，我们考虑用蒸馏水为溶剂。两种溶剂的吸光度变化都不大，但在波长765nm的时候趋于平稳，因此选择显色效果最好的760nm为本实验体系的检测波长。
3.2 反应体系各条件的确定
Table 2 Establishment of different reaction conditions in determination
Temperature Time FC reagent 20%Na2CO3
Tem(℃) A Time(min) A Dosage(ml) A Dosage(ml) A
30 0.893 5 1.035 0.5 0.268 2.0 0.767
40 0.885 10 1.063 1.0 0.511 4.0 0.738
50 0.756 20 1.073 1.5 0.602 6.0 0.847
60 0.396 40 1.077 2.0 0.582 8.0 0.772
70 0.200 60 1.044 2.5 0.513 10.0 0.580
80 0.104 80 1.022 3.0 0.662 12.0 0.519
Folin-Ciocalteu 显色体系中采用不同反应条件对吸光度的影响是很大的，随着温度的降低，吸光度一直下降，到了50℃的时候陡然增加并趋于平稳，因此我们选用的是温度是50℃；随着时间的增加，40min的时候达到顶峰，并且在60℃的时候陡然降低，因此我们选用的时间点是40min；FC试剂与酚类化合物反应后必须在碱性环境下才能显色，因此碳酸钠溶液的用量影响了反应液的显色效果，从实验的表格上可以看出10mL的碳酸钠的时候变化最大，因此选择的碳酸钠为10mL，而FC试剂的用量和碳酸钠溶液的用量比是1:5，因此，FC试剂的用量为2mL。综合考量上述内容我们可以确定本实验体系的反应条件：显色温度为50℃；显色时间为40min；FC使用量为2mL；碳酸钠使用量为10mL。
3.3 标准曲线的建立
通过实验得到的数据如下（A,C）：（0,0.004）,（0.001,0.176）,（0.002,0.325）,（0.003,0.486）,（0.004,0.634）,（0.005,0.785）,（0.006,0.907）。以吸光度为横坐标坐标，总多酚含量为纵坐标，建立标准曲线如图1所示。
用EXCEL软件记录数据算出标准曲线，从上图可以看出，R2=0.9949表明数据的相关性很高。没食子酸和吸光值有着良好的线性关系，在此范围内线性回归方程为y=0.0064x(R2=0.9949)。
3.4 吸光度的确定
通过紫外分光光度计的读数我们得到了以下的吸光值图2
水果(Fruit) 苹果 香蕉 橙子 梨
次数(Frequency) Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅰ Ⅱ Ⅲ
吸光值（A760）Absorbance at 760nm 0.044 0,053 0.061 0.116 0.105 0.120 0.133 0.122 0.119 0.031 0.030 0.035
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