摘  要最近这些年以来,由于温室效应以及环境的日益恶化导致全球气温不断升高,所以使得棉花的产量和品质也不断下降。前期的实验得到了陆地棉雄性不育材料,通过cDNA-AFLP筛选到了与育性相关的基因,现选取其中的一个,将其命名为GhRub(1,5二核酮糖羧化酶/加氧酶大亚基N-甲基转移酶),进行详细分析。主要利用生物信息学进行分析,包括对生物学数据的收集、整理和利用,还包括从蛋白质的氨基酸序列去预测蛋白质的结构以及分析序列中表达结构功能的生物信息等。另外,为了进一步对其进行功能验证,构建该基因的病毒干涉载体,期望后期通过VIGS技术对该基因功能进行功能验证。72405

毕业论文关键词:棉花;雄性不育;分子调控;病毒介导基因沉默;转化;生物信息学分析

Abstract   In recent years,the global temperature has been rising due to the greenhouse effect and the deteriorating environment,Therefore, the yield and quality of cotton is also declining。The prelimi-

nary experiment was made on the male sterile material of upland cotton,Through the cDNA-AFLP screening to the fertility related genes,Now select the A, the name for the GhRub (1,5 second ribu-

lose carboxylase / oxygenase large subunit Based n - methyl transferase), is analyzed in detail。Us-

ing bioinformatics analysis, including the biological data collection, arrangement and utilization, including from the amino acid sequence of a protein to predict the structure and function of biolo-

gical information expression in protein structure and sequence analysis。In addition, in order to fur-

ther verify the function of the gene, the gene was constructed, and the virus vector was constructed, and the function of this gene was verified by VIGS technology。

Keyword: cotton; male sterile;molecular regulation ;VIGS ; transform;Bioinformatics analysis 

目录

摘要 4

关键词 4

1。前言 5

    1。1棉花育种的背景 5

1。2棉花育种的意义 6

2。研究方法 7

    2。1cDNA-AFLP技术 7

    2。2目的基因cDNA全长序列的获得 9

    2。3感受态细胞的制备 10

    2。4PCR产物纯化试剂盒简明步骤 11

    2。5目的基因的生物学分析 12

    2。6病毒载体的构建 12

3。结果分析 13

    3。1陆地棉C312和其雄性不育突变体MS1的差异表达基因序列分析 13

    3。1。1差异表达基因库的构建 13

    3。1。2目的基因的筛选 14

    3。2目的基因Rub序列的生物信息学分析 15

    3。3病毒载体的构建 19

4。结语 20

参考文献 21

致谢 23

1。前言

1。1棉花育种的背景

棉花是世界上最重要的纤维作物,也是我国最重要的经济作物,棉花纤维是纺织工业中最主要的天然原材料,其优点是气息清新,天然柔软,对皮肤无刺激,是健康保暖的绿色产品。因而在我国以至世界的经济中占有无比重要的地位。虽然棉花是重要的农产品之一,但是它受到天气环境等各种因素的影响,这些年来又因为室温效应以及环境的逐渐恶化,使得全球的气温日益升高,从而导致了棉花的高温雄性不育,对棉花产量和品质造成了巨大的损失。但是目前植物的雄性不育分子作用机制仍然不清晰,因此利用棉花雄性不育突变体分析雄性不育的分子调控机制对棉花产量和品质改良育种具有很重要的意义。论文网

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