3。4目的蛋白的诱导表达 17

3。5重组蛋白的可溶性诱导表达条件的优化 18

3。6目的蛋白的纯化 19

4。结论与展望 20

4。1结论 20

4。2展望 20

致谢 21

参考文献 22 

1。 绪论

1。1植物乳杆菌概述

植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）是厌氧或者兼性厌氧菌，菌种呈现出直或弯的杆状，成对、单个或成链状，最适氢离子浓度指数为约6。 5，属于相同类型的发酵乳酸菌。植物乳杆菌最适生长温度在30~35℃，常存在于发酵的蔬菜和果汁当中。它作为人类胃肠道益生菌组，具有维持肠道菌平衡、提高机体的免疫力、促进营养物质吸收等许多功能[1]。由于植物乳杆菌对食盐、亚硝酸盐、等具有良好的耐受性[2]，对蛋白质、脂肪没有明显直接的分解作用等特点，在肉类发酵中应用广泛。同时，也广泛用于植物性食品中的发酵[3]，另外使用植物乳杆菌还可以生产共轭亚油酸。

1。2低聚果糖概述

低聚果糖（Fructooligosaccharides，FOS）也被称为蔗果三糖族低聚糖或是寡果糖，是指2-10个果糖基作为链节，该链以 β(2-1)或 β(2-6)糖苷键结合得到的碳水化合物。自然界中，FOS普遍存在于单子叶植物和双子叶植物中，如大蒜、洋葱、菊芋等等。根据不想同的生产工艺，FOS可以分为两种：一种是蔗糖通过β种果糖苷酶的糖基转移产生，包括蔗果三糖（GF2）、蔗果四糖（GF3）、蔗果五糖（GF4）的混合物，简称为GFn型FOS；另一种是菊粉通过内切菊粉酶末端部分水解而得，聚合度在2-10范围内，简称FFn类型的FOS[4]。

大多数的双歧杆菌能够有效地利用FOS，因此FOS作为一种最常用的双歧因子被广泛用于增殖双歧杆菌。大部分的嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和干酪乳杆菌都可以使用FOS，但是益生菌株LGG不能使用FOS，保加利亚乳杆菌也不能够使用。通过这些知识帮助我们更科学地了解益生元和益生菌，知道了被广泛认可的FOS并不能增殖所有的乳酸菌[5]。

低聚果糖作为一种对人类、对生物都具有特殊生理作用的功能性低聚糖[6]，具有以下几个生理特性：提高身体的免疫能力；能够减少血脂，减少血液中胆固醇和甘油三酯的含量，改善脂质代谢；低聚果糖不易使血糖升高，糖尿病人可以食用；另外临床研究表明每日服用0。5-5g这种不可消化的寡糖（GF2-GF20）可有效地降低中耳炎的发病率，聚合度为2-20的半乳糖寡糖、果聚糖、木糖寡糖也具有相同的效果。可以把低聚果糖加进婴幼儿食品、少儿饮料等食品方便服用，有效地使用此方法降低中耳炎的发病率，能够降低抗生素治疗中耳炎给人体带来的危害。[7]低聚果糖对人体而言好处非常的多。

1。3乳酸菌代谢低聚果糖调控的研究进展

研究表明乳酸菌代谢 FOS 的方式主要分为两类（图1）：一类是 FOS 完整的转运进胞内后再由胞内的果糖苷酶进行水解，包括嗜酸乳杆菌、唾液乳杆菌和大部分双歧杆菌；另一种是先由胞外的酶对 FOS 进行水解，再将水解产物运输入胞内，如副干酪乳杆菌和戊糖乳杆菌等都是采用这种方式[8]。负责转运 FOS的转运蛋白主要包括三种： ABC（ ATP-binding cassette transporter）转运系统、磷酸转移酶系统（ 氢离子浓度指数os氢离子浓度指数otransferase system, PTS）和透性酶系统；具有水解 FOS功能的酶有多个，包括：果糖苷酶、菊粉酶、果聚糖酶、果聚糖 β-果糖苷酶、 2,6-β-果聚糖-6-果聚糖水解酶等。