麦芽糖标准(ml)
H2O(ml)
3-5-二硝基水杨(ml)
麦芽糖含量 (mg) 0 0。2 0。6 1。0 1。4 1。8 2。0
2。0 1。8 1。4 1。0 0。6 0。2 0
2。0 2。0 2。0 2。0 2。0 2。0 2。0
0 0。2 0。6 1。0 1。4 1。8 2。0
OD520
(三组重复) 0 0 0。012 0。014 0。007 0。017 0。011
0 0。002 0。010 0。015 0。007 0。011 0。011
0 0。001 0。002 0。021 0。007 0。018 0。011
绘制标准曲线, 其回归方程为Y(麦芽糖含量)=88。0542X+0。25783。
2、样品测定:
取第三天15%浓度处理下的高粱、麦子种子各5个,谷子种子50个,玉米种子各两个,设置三组平行,放置于研钵种研磨,加入蒸馏水,研磨三次,捣碎溶于溶液,取上清液。取先洗干净试管,依次编好次序。取粗酶液1ml各试管中(三组平行),各只试管分别加入0,0,1ml蒸馏水,于60摄氏度水浴中,事先加热入热5min,各加入2%淀粉溶液柠檬酸淀粉缓冲液1。5ml。放置于一旁温水中(40度)中保持温度,等待半小时,再有序地顺次加入DNS试剂,每个试管1。5ml,然后放在滚烫的开水中煮5分钟,然后混合再次,最后用0。4mol/L的氢氧化钠溶液终停此次反应,加蒸馏水定容到刻度20ml,均稳震荡,测520nm处OD值。在表上看对应的OD值,接着计算出淀粉酶活力。
1。4 试验分组
除玉米种子外,每个种子都要设置3次重复,玉米种子因为种子大一些,要设计成5次重复。分别标记1、2、3组高粱,小麦,谷子种子每组重复50粒种子,1,2,3,4,5组玉米种子每组设置20粒种子,每组种子加入6个浓度梯度的PEG溶液,每天记录种子的萌发情况。总共统计6天,6天后结束实验。
1。5 测定项目
1。5。1发芽特性测定
发芽率(germination rate,GR)%= n/N*100%(正常发芽数/供试种子数×100%);
发芽势(germination energy,GE)%=n/N*100%(6d内发芽数/供试种子数×100%);
发芽指数(germination index,GI)%=∑(Gt/Dt) (∑第t日发芽数/Dt为Gt相应天数);
日相对发芽率=n/SNO×100% 文献综述
1。5。2酶活性测定
1。6 试验数据分析
运用WPS对以上数据作图,采用SPSS 分析。进行相同植物的不同浓度以及相同浓度下不同植物检的Duncan方法0。05显著水平上的多重比较。采用Matlab软件作线性回归方程分析,得出麦芽糖含量,后计算出酶活力。