Keywords : endophytes; phyllosphere strain; quorum sensing signal; quorum sensing inhibitor; reportor strain

目次

1 绪论 1

1。1 抗细菌感染药物研究现状 1

1。2 群体感应 1

1。2。1基于AHL的QS 2

1。2。2基于寡肽的QS 2

1。2。3其他的QS系统 3

1。3 QS引起的担忧 3

1。4 群体感应的抑制 3

1。4。1 用于检测QS信号的细菌报告基因和QSI的筛选 3

1。4。2 QSI的筛选标准 4

1。5 天然的群体感应抑制剂（QSI） 5

1。5。1 原核生物中的QSIs 5

1。5。2 动物中的QSIs 7

1。5。3 植物中的QSIs 8

1。5。4 海洋生物中的QSIs 9

1。5。5 真菌中的QSIs 10

1。5。6 抗体中的QSIs 10

1。6研究内容和意义 11

2 产群体感应信号分子或抑制剂的菌株的筛选和活性评价 12

2。1 实验材料与仪器 12

2。1。1 实验材料 12

2。1。3 培养基与试验用溶液的配置 12

2。1。4 试剂 13

2。1。5 主要实验仪器 13

2。2 试验方法与步骤 14

2。2。1 石榴内生菌的分离 14

2。2。2 二月兰叶际菌的分离 15

2。2。3 植物内生菌活性物质的提取 15

2。2。4 摇床发酵产物的紫色杆菌CV026的QSI活性筛选 15

2。2。5 摇床发酵产物的根癌农杆菌KYC55的QSI活性筛选 16

2。2。6 二月兰产信号分子叶际细菌的筛选 16

3 实验结果 17

3。1 QSI活性菌株的筛选 17

3。2 产信号分子菌株的筛选 18

3。3 讨论 18

结论 20

致谢 21

参考文献 22

1 绪论

1。1 抗细菌感染药物研究现状

1。2 群体感应

细菌群体感应是Fuqua等于1994年首先提出的[6],是指细菌能生成并分泌一种信号分子，随着细菌密度的增加，信号分子的浓度不断增大，当浓度达到一定值后，能够与其他细菌进行交流，调控相关基因的表达。QS系统控制着许多细菌毒力行为和表型，包括毒素的生成、致病因子的释放、生成胞外多糖，生成生物被膜等[7]。论文网

1。2。1基于AHL的QS

在依赖AHL的细菌QS系统中，一种单个合酶-调节复合物负责特定基因的表达。在这种情况下，该信号分子的合成是在低浓度水平上，由合成酶基因（如luxI）完成的，并分布在细胞内和细胞周围。在高细胞密度时，它与其受体结合并激活转录调节因子（LuxR）。AI-LuxR再结合到DNA上（基因的启动子区域），并触发QS系统调控的基因的表达[8]。与在大多数病原菌中发现的单个的自诱导物信号合酶基因/转录调节基因（I/R）系统相比，在假单胞菌、根瘤菌和弧菌中发现了多（I/R）系统。铜绿假单胞菌产生两种AHL分子——3OC12-HSL和C4-HSL，它们结合到各自的转录调节因子——LasR和RhlR上[9]。LasR/A1复合物激活RhlR和RhlI，来表达它们的毒力基因。另一个称为假单胞菌的喹诺酮信号，它连接两个QS系统。QscR，第三种LuxR的类似物用于表达lasI的转录。这三种受体——LasR，RhlR和QscR有独立的和重叠的调节子，比如LasR调节RhlR，LasI调节QscR。此外，苜蓿中华根瘤菌已被报道具有三个QS系统，称为Sin，Tra和Mel。这里，Sin系统产生的AHLs有大于14个C的酰基链——C14HSL到C18HSL，参与到其宿主苜蓿根瘤的高效固氮中。哈氏弧菌的QS通过三种不同的途径运作，通过被称为HAI-1，CAI-1和AI-2的AIs调节。在这种菌中，HAI-1具有OHC4HSL的化学结构，确保了一种特殊的AHL通路，CAI-1——（S）-3-羟基十三烷-4-酮有助于细菌属间的交流，AI-2，一个呋喃硼酸二酯，特定用于细菌的种间交流。最初在哈氏弧菌中报道的AI-2调节的QS系统，随后在大量的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中被发现[10]。