几丁质（Chitin）即甲壳素，在自然界中的储存量非常庞大，仅次于含量最多、分布最广的纤维素，因此被誉为第二大天然多糖。甲壳素首先是从蘑菇中提取得到的，当时被命名为蕈素（Fungine）。12年后即1823年，另一法国科学家欧吉尔在甲壳动物外壳中也提取到了甲壳素并把它命名为几丁质[3]。真菌、昆虫和甲壳类动物中含有丰富的几丁质，几丁质是刚性很强，生物亲和性好的一类多糖，有多种衍生物，但缺点是在大多数溶剂中很难溶解，常被应用于化工产业[4] 。

几丁质经过脱乙酰化后得到壳聚糖，又称脱乙酰甲壳素、可溶性甲素，化学名称为β-(1,4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡聚糖。一般而言，甲壳素的脱乙酰度超过55％，就可称为壳聚糖[5]。壳聚糖作为几丁质脱乙酰后的产物，是自然界唯一大量存在的碱性多糖。壳聚糖具生物相容性、生物可降解性、无毒副作用及天然广谱抗菌力等优点，被广泛应用于农业、医药、食品以及化妆品和纺织等领域。目前对食用菌壳聚糖的研究多以菌丝体为材料，而从对子实体壳聚糖的研究并不是很多[6]。本实验以褐蘑菇为实验材料，利用浓碱脱乙酰制备壳聚糖，以同种栽培料下的双孢蘑菇为样品对照，以Vc为阳性对照，通过分析清除DPPH自由基、羟基自由基（·OH）以及清除亚硝酸的能力，进一步研究褐蘑菇品种壳聚糖的抗氧化性能，旨在为开发褐蘑菇功能性产品做理论支撑。

2材料与方法

2。1 实验材料

以水稻秸秆为栽培料的褐蘑菇（苏棕5号）和双孢蘑菇（As27963）子实体都由淮安市丁集镇提供。50℃烘干，粉碎过60目筛备用。

2。2 药品与试剂

无水乙醇、氢氧化钠、冰醋酸、硫酸亚铁、水杨酸、过氧化氢、柠檬酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、碳酸钠、抗坏血酸（Vc）、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)、无水对氨基苯磺酸、亚硝酸钠均为国产分析纯，DPPH东京化成工业株式会社。

2。3 主要仪器

三用恒温水箱（金坛市正基仪器有限公司）、Q-250B3型粉碎机（上海冰都电器有限公司）、BS 423S型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)、H。H。S 21-6型电热恒温水浴锅（上海医疗器械五厂）、DHG-9240型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宠实验设备有限公司）、Infinite M200 PRO型酶标仪（瑞士TECAN集团公司）、TDL-4低速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）、Centrifuge 5810R型离心机 （德国Eppendorf有限公司）、RE-3000型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）、SHZ-Ш型真空泵（上海亚荣生化仪器厂）、WH-3型微型漩涡混合仪（上海沪西分析仪器厂有限公司)、MC-305型高压灭菌锅（美国ALP有限责任公司）。 文献综述

3样品壳聚糖的制备

称取一定质量的菇粉并加入10倍体积1mol/L氢氧化钠溶液，100℃水浴3h后以4000r/min的速度离心15min，弃碱液。将过滤后剩余的沉淀物即几丁质用去离子水洗涤直至pH呈中性。沉淀物继续用95%乙醇脱色至上清液近无色。反复用去离子水洗涤至pH为中性后，每1。00g沉淀物加入30ml 10mol/L的氢氧化钠溶液，在105℃高温高压下脱乙酰化2。5h。离心30min后过滤得到沉淀物，重复用去离子水洗涤至中性的步骤[7]。已经洗涤至中性的沉淀物在10%乙酸中搅拌溶解，避免混入太多氧气。在95~100℃条件下水浴3h后，混合物经4000r/min离心得到上清液即为壳聚糖-乙酸饱和溶液。用浓度为10mol/L 氢氧化钠溶液调节pH直至pH为8~10后溶液中会出现白色絮状，此时析出的白色絮状物即为壳聚糖。离心20分钟后将得到的壳聚糖沉淀物用去离子水洗涤至中性，真空干燥后储存在棕色瓶中置于阴凉干燥处备用。准确称取壳聚糖粉末0。40g，用10%乙酸溶解并定容至100mL，配制成浓度为4mg/mL的壳聚糖乙酸溶液备用[8]。