1。3。2 微波辅助提取法

近年来，微波辅助提取已广泛应用于有机合成反应、催化化学反应等[9]。在微波辅助提取技术中，被处理物料通常是能不同程度吸收微波能量介质，整个加热过程是利用离子传导和偶极子转动机理[10]。微波辅助提取越来越引起人们的重视[11]，广泛应用于香料、调味品、天然色素、中草药和化妆品等领域[12]。

1。3。3 超声波辅助提取法

    超声提取的机理可分为两类：物理机理和声化学机理。超声提取的物理机理表现为：一定强度的超声作用于提取液，在提取液内产生机械效应、空化效应和热效应等。即超声空化在液体中形成局部热点和微射流冲击被提取物表面形成空化腐蚀，造成物质组织结构的破坏，加速其成分在溶液中溶解的速度，提高提取效率。声化学机理表现为：超声波强化被提取物与提取剂的水合过程，提高被反应速度和条件，从而提高了提取效率。但从实质上讲，提取过程是指被提取物在片状或颗粒状表面与溶剂反应的过程。郭娇娇[13]等人对苹果中的多酚的超声辅助提取工艺条件进行了优化设计，确定最佳工艺条件。同时，超声波辅助提取方法也在茶叶多酚[14]、酸梅多酚[15]中也有相应的研究。

1。4 评价抗氧化能力的反应体系

1。4。1 福林-酚法

  丑柑果皮中的多酚类化合物有黄酮苷、酚酸、单宁、二苯乙烯等。多酚类化合物在碱性条件下，可利用其还原性，将磷钨钼酸还原成蓝色，蓝色深浅程度与含酚基团的数目成正比，最后采用分光光度计测定其吸光度，以吸光度的数值反应钨钼酸的还原程度。

第2章  丑柑果皮多酚提取实验

2。1 实验材料与方法

    利用超声波辅助提取法，通过响应面法结合单因素试验提取丑柑果皮多酚，以多酚得率为指标，确定乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度的最佳工艺条件。

2。1。1 实验材料、试剂

    丑柑；无水乙醇；没食子酸；Na2CO3；福林-酚试剂；无水乙醇

2。1。2 实验仪器

   电子天平；冷冻干燥机；粉碎机；离心机；超声波提取机；旋转蒸发仪；超声波清洗机；分光光度计

2。1。3 标准曲线制备文献综述

    准确称取0。01 g没食子酸粉末，用蒸馏水溶解并定容至100 mL，得到浓度为100μg/mL的没食子酸标准溶液。

    准备干燥洁净的25 mL试管，用移液管准确移取0 mL、0。25 mL、0。50 mL、0。75 mL、1。00 mL、1。25 mL、1。50 mL没食子酸标准溶液于试管中。用移液枪分别加入3。0 mL的福林-酚试剂，摇匀静置30 s。再用移液枪分别加入6。0 mL 12% Na2CO3溶液，最后加蒸馏水摇匀定容至25 mL，在室温下避光放置2 h，在760 nm波长处测定吸光度（以0样作为空白）。

    平行试验，重复第二个步骤两次，三次平行试验取平均值。没食子酸（μg）作为横坐标，吸光度作为纵坐标，绘制得到标准曲线。

图1 没食子酸标准曲线

Fig。1 Standard curve of gallic acid

2。1。4 实验方法

    新鲜丑柑果皮冷冻干燥，通过粉碎机粉碎至粉状，储藏于-4℃冰箱中备用。

    取丑柑果皮粉末2。00g，置于超声提取瓶中，加入一定量的一定浓度的乙醇。在超声波提取机中按一定条件提取，离心后的上清液倒入旋转蒸发瓶中，以30℃，45rpm/min的条件下旋转蒸发。冷冻干燥后将旋蒸瓶储藏于-80℃冰箱中备用。

    测量前将蒸发瓶取出，称取0。08g样品，加入100g无水乙醇，配制为浓度为800ppm的样品提取物备用。