2。3 硼酸对Penicillium expansum菌落扩展的影响 文献综述
将100μL浓度为1。0×106spores/mL的Penicillium expansum孢子悬浮液均匀涂布在PDA培养基上,培养24 小时后,用打孔器打孔,获取直径为0。5cm的菌饼,小心地放置在含20mL PDA培养基的培养皿(直径为9 cm)中央,培养基中含有最低抑菌浓度的硼酸,并以空白PDA作为对照。将培养基放置于25℃环境下恒温培养,并且每天都观察菌落的径向生长并记录下两个组每天的菌落直径,直到对照组的的菌丝已经生长到培养皿的边缘。每组实验重复做6次。
2。4 硼酸对Penicillium expansum菌丝生物量积累及总糖吸收率的影响
将加入最低抑菌浓度的硼酸和没有加入硼酸处理的Penicillium expansum于25℃环境下以200r/min的速度于摇床上进行振荡培养。分别在培养24,48,72小时后,将培养液以10000r/min的速度进行15分钟的离心,分离出真菌生物量和上清液。收集菌丝体,并用液氮快速冷冻进行以下实验。通过使用葡萄糖作为标准的3,5-二硝基水杨酸法(DNS)测定培养物滤液的总糖含量。DNS法:在碱性的条件下,3,5-二硝基水杨酸法(即DNS)能与还原性的糖发生氧化还原反应,其反应产物3-氨基-5硝基水杨酸在煮沸条件下会显现出棕红色,并且在一定的浓度范围内,棕红色的颜色深浅程度与还原糖的含量呈现出一定的比例关系,因此可以用比色法测定出还原糖的含量。