3。5  PLGA微球的降解性能 17

3。6  PLGA微球的红外光谱分析 19

3。7  PLGA微球表面的蛋白接枝 20

结  论 22

致  谢 23

参 考 文 献 24

1  绪论

1。1  组织工程

组织工程的主要研究方法是：从机体内获得少量的活体细胞，在体外培育增殖，后将足够量的细胞吸附于某种生物材料上形成细胞-生物材料复合物，具有空间立体结构，该生物材料必须生物相容性良好且降解后的产物可以排出体外或被机体吸收。将这种复合物植入生物体需要修复的部位，复合物中的活体细胞将会在材料的降解和被机体分解吸收的过程中持续生长、繁殖，最终形成满足组织修复要求的形态和功能的新的组织或器官，从而实现细胞创伤处的修复和重建[1]。

聚合物纳米微球一直被应用于基因传递系统和药物释放系统，在组织工程中应用广泛。例如：对微球载体使用表面接枝等表面改性技术，得到有利于细胞增殖和黏附的载体；随着微球制备和烧结技术的不断进步，将微球制备成三维支架的条件不再苛刻；利用载药微球可实现组织工程支架中药物的可控释放，微球的包埋方式不同，适用的支架类型也不同[2]。当然，在组织工程中，微球技术的发展也面临着很多挑战，难题主要包括以下几点：

第一，种子细胞的来源和成活率。组织工程需要大量的种子细胞用来培育和研究，种子细胞一般在体外进行人工扩增后再种植到支架上，通常采用单层培养法培育活体细胞。种子细胞的来源匮乏是限制组织工程发展的一大瓶颈。目前，只有极少量的组织细胞，例如：软骨细胞、角质形成细胞等可以通过体外培养获得，大部分组织细胞如：神经细胞、肝细胞等供体来源非常有限。不仅如此，很大一部分种子细胞在体外培养过程中会发生老化等现象，从而丧失基本生理功能，难以通过体外分离培养获得研究所需的足量的细胞甚至是组织器官。

第二，支架的制备及性能。组织工程支架直接与活体细胞结合，因此必须具备优良的生物相容性；为容纳细胞并保证其生理功能发挥，支架要有微孔结构；在结构上需要加强损伤部位的强度，为体内的负重提供有效的支撑作用；阻碍周围组织细胞的侵入；为了再生原组织，支架材料应该是使用完成后可自主降解的无毒性材料。制备三维支架的常见方法有气体发泡法、纤维粘接法、微球烧结法等。微球烧结支架的优点在于：力学性能优异，便于塑形；孔的形成不需要依靠发泡剂，孔径大小可以自由调控；便于载药，药物释放的过程可控等。

第三，药物在支架上的包埋，以及长期稳定可控的释放过程。在组织的再生过程中，为了促进细胞的生长和增殖，调节细胞功能，需要使用生长因子。生长因子是具有调节功能的多肽类蛋白药物，在组织工程中通常需要多种生长因子的相互协调作用[3]。与此同时，为了避免包埋和植入过程可能出现的炎性反应，常要使用抗炎类、抗生素类等药物。使用聚合物微球包埋药物并加入到组织工程支架中，是一种安全的控制药物释放的方法，可大规模工程化。微球作为可控的药物传递载体具有如下优势：（1）生长因子可实现长期稳定的释放[4]；（2）药物释放的过程可控[5]；（3）在多种生长因子存在的情况下，可同时或按顺序释放生长因子；（4）保护蛋白类药物不受污染，并长期维持其生物活性。