[关键字PTEN;,环氧化酶
[摘要]目的:通过检测抑癌基因PTEN和环氧化酶2(COX2)在大肠癌中的表达,探讨其在大肠癌中的意义。方法:应用SP法免疫组化方法检测10例正常大肠黏膜。80例大肠癌组织中PTEN和COX2的表达。结果:正常大肠黏膜中PTEN为强阳性表达,在大肠癌中论文网有41。2百分号为阴性或弱阳性表达,明显低于正常组(P<0。01);COX2在正常大肠黏膜中80百分号为阴性表达,而在大肠癌中阳性率为72。5百分号,显著高于正常组的表达(P<0。01);在大肠癌中PTEN和COX2存在负相关(P<0。05)。结论:抑癌基因PTEN和COX2在大肠癌的发生发展过程中起着重要的作用。
[关键字]PTEN;环氧化酶2;大肠癌
ExpressionandSignificanceofTumorSuppressorGenePTENandCyclooxygenase2inColorectalCancer
Abstract:ObjectiveTodetecttheexpressionoftumorsuppressorgenePTENandcyclooxygenase2(COX2)incolorectalcancer,andanalyzetheirsignificance。MethodsSPimmunohistochemicalmethodwasusedtodetecttheexpressionofPTENandCOX2in10casesofnormalcolorectalmembraneand80casesofcolorectalcancer。ResultsTheexpressionofPTENinallofthenormalcolorectalmembranewerepositive,andexpressionofPTENin41。2百分号casesofcolorectalcancerwerelowornegative,whichwasmuchlowerthanthenormalgroup(P<0。01)。ThenegativerateofCOX2innormalgroupwas80百分号,whileincolorectalcancer,thepositiveratewas72。5百分号,whichwassignificantlyhigherthannormalgroup(P<0。01)。AnegativecorrelationwasobservedbetweentheexpressionofPTENandCOX2。ConclusionOurdatasuggestthatPTENandCOX2playanimportantroleinthedevelopmentofcolorectalcancer。
Keywords:PTEN;COX2;Colorectalcarcinoma
大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,对其癌变的机制一直是研究的热点。抑癌基因与张力蛋白同源10q丢失的磷酸酶基因(Phosphataseandtensinhomologydeletedonchromosome10,PTEN)与各种肿瘤的发生。发展密切相关,在大肠癌也发现有PTEN基因表达的异常。环氧化酶2(Cyclooxygenase2,COX2)在很多肿瘤中呈高表达并与肿瘤的形成密切相关,但其作用机制尚不清楚。本文拟通过检测大肠癌中PTEN和COX2的表达情况,并探讨两者之间的相关关系。
1材料和方法
1。1标本来源收集广东医附属医院1996年至2004年间大肠手术及活检标本共90例(患者术前均未接受过化疗。放疗),其中正常大肠黏膜10例,大肠癌80例,其中高分化30例,中分化27例,低分化23例,35例伴淋巴结转移。所有标本均用10%甲醛液固定,常规石蜡包埋,4μm连续切片,并经HE染色后由病理学专家确诊。
1。2主要试剂鼠抗人PTEN单抗(工作型)。兔抗人COX2(浓缩型,工作浓度为1∶100)。SP免疫组化试剂盒及DAB显色液均购自北京中山生物技术有限公司。
1。3实验方法所有标本均经甲醛液固定,常规石蜡包埋,4μm连续切片,常规脱蜡。梯度酒精水化至水,微波修复,自然冷却至室温。采用SP法免疫组织化学染色,DAB显色3min~5min,苏木素复染5min,盐酸酒精分化数秒,流水返蓝15min,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。用PBS代替一抗作为空白对照,已知阳性片作阳性对照。在光学显微镜下进行观察。
1。4免疫组化结果判定PTEN及COX2阳性均定位于胞浆及胞膜,呈黄色或棕黄色颗粒。采用双盲法统计实验结果。随机选取10个高倍视野进行计数,计数阳性细胞所占的百分比,根据阳性细胞的比例分为以下四个等级:<5%为阴性(-),5%~25%为弱阳性(+),26%~50%为阳性(++),>50%为强阳性(+++)。
1。5统计分析采用SPSS12。0统计软件包进行统计,率的比较采用χ2检验,相关性分析采用Spearman等级相关分析,检验水准取双侧α=0。05。
2结果
2。1PTEN在大肠癌中的表达情况,见表1。
表1大肠癌中PTEN的表达(略)
注:与正常组相比,P<0。05
PTEN在正常大肠黏膜中均为强阳性表达,而在大肠癌中有33例PTEN蛋白表达缺乏(阴性组)或减少(弱阳性组),占41。2%,显著低于其在正常大肠黏膜中的表达(χ2=20。911,P=0。000<0。01)。同时PTEN与大肠癌的分化程度差异无统计学意义(χ2=4。649,P=0。590>0。05)。
2。2COX2在大肠癌中的表达情况,见表2。
表2COX2在大肠癌中的表达情况(略)
星号注:与正常组相比,P<0。05。
COX2在正常大肠黏膜中主要以阴性表达为主,占80%(8/10),在大肠癌中的阳性率为72。5%(58/80),显著高于其在正常大肠黏膜中的表达(χ2=13。163,P=0。004<0。01)。同时COX2与大肠癌的分化程度差异无统计学意义(χ2=3。890,P=0。692>0。05)。
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