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      (1)
    其中xaj表示样品指纹图谱中非共有峰j的峰面积,nt表示共有峰数。
    尽管d值大小可表示样品指纹图谱向量X与对照指纹图谱向量Y的相似程度,但取值范围在(0~∞)之间,通过负指数函数能把取值在(0~∞)变化的函数转换为取值(0~1)函数的特点[10],将公式(1)转化为公式(2),其中S代表样品的相似度:
    S=e-d         (2)
    公式(2)中S取值域在(0~1)之间,但如果直接使用公式(2)进行相似度计算,那么不同中药的判断阈值必定各不相同,不能满足“不同中药评价判断阈值统一为0.9,相似度大于0.9就可以判定样品质量合格”这个条件,必须对公式(2)进一步优化。若引入了一个特征系数ω,得到公式(3):
    S=e-ωd         (3)
    令ω=ln0.9/-d阈(d阈代表样品判断阈值对应的d值),则不同中药的判断阈值都能统一为0.9。具体公式如下:
      (4)
    对于每一种中药,都有一个对应的ω值,实际应用时ω大小由中药药学实验确定,目前水平下ω的具体数值由d阈[6](本文指最差合格样品对应的d值)计算。ω可以作为企业或者实验室的保密值,当他人无法得到ω的具体值并且得不到足够多的标准品时,就很难对特定中药进行相似度评价。
    2.实验部分
    仪器:岛津LC-10ADvp高压泵,岛津SPD-M10Avp二极管阵列检测器,岛津CLASS-vp工作站;柱温箱:TC-100(天津市金洲科学仪器有限公司),循环微波萃取装置。
    药材:香丹注射液(上海通用药业股份有限公司,批号:031082、0310119、0310116、0310127、031062、0310117、0310130、031096、0310112、0310106,共计10批次),香丹注射液(上海中西药业股份有限公司,批号:0305011、010701,共计2批次);按《中国药典》规定中药取样法于河南省封丘县采集的金银花药材[11],共11批次,编号:hf1~hf11;同法取自湖南省淑浦和湖北省恩施的金银花药材,编号分别为nga1和nga2。
    香丹注射液色谱条件:色谱柱:1. Alltima C18(5 μm,4.6 mm×250 mm), 2. Purospher Start RP-18e(5 μm, 4.6 mm×250 mm);柱温:30℃;流动相: 1%冰醋酸水溶液(A)-1%冰醋酸甲醇溶液(B)采用梯度洗脱:10%B100%B(055 min), 100%B10%B(5560 min), 10%B(6090 min);流速: 1.0 mL/min;检测波长:280 nm;进样量:20 L。
    金银花色谱条件:A(乙腈)-B(酸水,水-磷酸=100: 0.4)进行梯度洗脱:0~10 min (10%A~10%A), 10~60 min (10%A~30%A), 60~75 min (30%A~90%A), 75~80 min(90%A~90%A), 80~90 min(90%A~10%A),90~120 min(10%A~10%A);流速1.0 mL/min,进样体积20 μL,检测波长237 nm。
    香丹注射液稀释溶液的配置:精确量取0.50 mL香丹注射液于10 mL容量瓶,定容至刻度,之后用微孔滤膜过滤,过滤后即可用于色谱实验。
    金银花待测溶液的配制:将金银花粉碎至20目,精确称取已粉碎的金银花1.000 g,置于微循环萃取装置进行萃取,萃取剂为15.00 mL55%乙醇溶液,并将得到的萃取液用55%乙醇溶液定容至25.00 mL。取上述溶液2.50 mL继续用55%乙醇溶液稀释至10.00 mL,过C18固相萃取柱,用微孔滤膜过滤,得到的滤液即可用于色谱实验。
    3.结果与讨论
    本文所有d值和S值的计算是通过运行于WindowsTM 8.0系统的Microsoft® Excel 2010进行的。
    3.1香丹注射液相似度计算
    图2-1~2-12为12个批次香丹注射液的指纹图谱,峰面积数据经逐一匹配后得到表1,将上海通用药业的八个批次(批号:031082、0310119、0310116、0310127、031062、0310117、0310130、031096)作为标准系列,得到一个标准,然后将同一厂家的0310106、0310112批次样品看作相近样品与之对比,将上海中西药业的0305011、010701批次样品看作差别样品进行对比。
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