超临界流体萃取:是上个世纪六十年代兴起的一种新型的分离待测物的技术,该方法选择不同溶解度超临界流体在高温高压下接触待分离的物质,当压力和温度恢复正常时,将分子质量不同,沸点不同,极性不同的物质萃取出来[53]。CO2是目前最常用的超临界流体,由于CO2温度较低和低零界压力,价格低廉容易获取,在分离分析提取中药时可以达到想要的目的。例如,提取挥发性的油类、提取苷类和糖类等大多采用这种方法[54]。这种技术具有生产周期短,操作温度低,选择性的分离,无溶剂残留,工艺流程相对简单等优点。但也存在一定的局限性,在提取极性大或者相对分子质量大的物质时提取率效率较低,而且,对设备要求较高,很难普及。

微波萃取:是根据不同组分接受微波的差异,选择性的加热体系中的某些机体或者某些组分,使待提取成分从样品中分离进入溶剂中,从而提高提取率的一种提取方法[55]。微波萃取具有高效快速、省时、重复性好、不破坏药物的活性等优点。对药材中的多糖、黄酮类、多酚类、萜类等的提取应用广泛[56],但是,微波萃取会存在泄漏等问题,所以对设备的安全性和密闭性要求很高。

高速逆流色谱分离技术:高效逆流色谱建立在液液萃取和流体动力学平衡的基础上,利用互不相溶的两相液体作为流动相和固定相,通过螺旋管的高速运动产生的不对称离心力场,实现两相的溶剂体系的有效混合、分配和保留,有效的分离溶剂中的物质的一种方法[57]。该技术具有提取产物纯度高,能够避免载体的污染,消耗的所需要的溶剂量少,可以大量制备分离产品等优点。能够很好的分离提取黄酮类、萜类等[58]。

除上述新技术外,还包括:分子印迹提取法[59]、酶法提取法[60]、半仿生提取法[61]等。这些提取技术具有提取率相对较高、损失比较少、周期短、针对性较强等优点。不断优化提取工艺,将现代的中药提取与生产工业结合,促进了中药的产业化发展。文献综述

1。6  本课题的研究目的与意义

中药成分复杂,因此,将有效成分富集浓缩除杂、并测定其含量是开发中药的关键。目前,对中药中的有效成分进行定量分析大多数采用高效液相色谱法、气相色谱-质谱以及气相色谱和质谱联用等方法,但这些方法都需要高纯度的对照品(标准品)。定量核磁共振方法无需待测物的高纯标准品,只需要常用的几种内标和氘代试剂就可完成定量分析[1],是常用方法的主要补充。但定量核磁共振在用于低于0。1%含量成分的分析时常常存在灵敏度问题,中药中的复杂干扰成分也会影响测定。直接对中药中的有效成分采用定量核磁共振技术进行定量常常存在一定困难。固相萃取作为一种方便有效的样品前处理技术,具有浓缩(富集)和净化样品功能,操作简便、回收率高。可以解决目前定量核磁共振存在的问题。

乳增宁胶囊具有调理冲任、解郁疏肝等作用[62]。已收入中国药典。本论文将固相萃取与定量核磁共振结合,以乳增宁胶囊为样品,用固相萃取技术在分离简化样品组成的同时,富集待测组分含量,建立固相萃取-定量核磁共振测定中药中的有效成分含量的方法,并对所建立的方法进行了验证,在不使用待测物高纯标准品的情况下测定了中成药乳增宁胶囊中ICA的含量。

第二章  固相萃取-定量核磁共振波谱法测定乳增宁胶囊中的ICA

2。1  引言

乳增宁由艾叶、淫羊藿、天门冬、柴胡、土贝母等多味中药组成,是国家三类中药新药,有调理冲任、疏肝解郁等功能,主要用于治疗冲任失调以及肝郁气滞引起的乳痛症以及乳腺增生等[62~66]。

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