Key words: Chaihu-Shugan-San;Traditional Chinese medicine;Pharmacokinetics; UPLC-Q-TOF-MSE
柴胡疏肝散(CSS)是一种经典的配方药剂,长期以来一直被用于缓解抑郁症症状及 功能性消化不良等症状,并且无相关副作用的报道 [1-3] 。 目 前 的 研 究 中 有 通 过 LC-LTQ-Orbitrap 鉴定了柴胡舒肝散 33 种化合物[4],然而还没有关于 CSS 多种物质 的药代动力学研究的报道。而中药的药代动力学研究对于评价草药的合理性和相容性至 关重要[5]。药物代谢研究是药物研发、评价、监控等环节中不可缺少的重要部分,同时也和药 物的生物利用度、安全性及有效性密切相干。
药理学研究表明药物治疗的关键在于机体代谢药物达到一定的浓度,而提高药物中有效成分浓度并保持足够长的时间,且在其低于有效浓度后快速代谢减少停留体内的毒 害时间,则是提高药物治疗效果的有效方法。药物代谢动力学是帮助研究复方成分协同 作用的有效手段,通过测定药峰浓度 Cmax、药峰时间 Tmax、药时曲线下面积 AUC、 平均滞留时间 MRT、半衰期 t1/2、生物利用度 F 以及清除率 CL 等指标直观反映药物浓 度随时间在体内的变化情况,这些参数反映了药物在体内吸收、分布、消除的过程。通 过结合对多种有效单体的测定来还原复方药剂的协同作用[6]。中药与化学药物不同多为 天然药物,由于其所具备的独特的“药性”“组方”等概念的复杂性及特殊性难以用现 代科学理论予以阐明所以发展进程稍显缓慢。只有明确中药的成分、体内过程尤其是代 谢行为;确证药效的靶点,即多成分多靶点协同作用,才能更好地研究中药。这也被称 为中药现代化。只有实现中药现代化,创立国际所认可的传统药物规范标准体系,创制具有自主知识产权的中药,才能以治疗药物身份进入国际医药市场,才能真正将中药发 扬推广,因此本课题具备非常良好的应用前景和商业潜力[7]。
近年来,许多分析技术可以用来评价草药或草药制剂的质量,如高效液相色谱 (HPLC)、超高效液相色谱(UPLC)、液相色谱-质谱(LC-MS)、指纹图谱(Fingerprint analysis) 等技术得到了广泛的应用[8-10]。同时对柴胡舒肝散的研究也颇多,如对柴胡舒肝散治疗 功能性消化不良[11]以及抗抑郁[12]等功能进行比较研究,其治疗效果都颇为显著。还有测 定柴胡舒肝散活性成分[13]以及多种提取测定活性物质的方法[14]。这些先例都能帮助本课 题更好的建立实验流程和分析方法。本实验用 UPLC-Q-TOF-MSE 的方法结合药物代谢动力学对柴胡舒肝散进行研究, 并对建立的测定方法进行准确度、精确度等方面的考证以确认其的可靠性,同时测出柴 胡舒肝散 9 种单体成分的药物代谢动力学指标。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 标准品
芍药内酯苷(C4)、阿魏酸(C7)、柚皮苷(C12)、橙皮苷(C13)、水合橙皮内酯(C16)、 甘草酸(C23)、柴胡皂苷 A(C34)、川陈皮素(C25)、橘皮素(C26)的标准品。
内标 1(IS1,磺胺甲恶唑)、内标 2(IS2,五味子醇甲)。
1.1.2 血浆样品
从南京农业大学动物实验中心获得健康雌性/雄性 Sprague-Dawley 大鼠(220±5g)
6 各只,血浆样品由自己采集。
1.1.3 实验试剂
乙腈、甲醇(色谱纯):Merck 公司生产; 甲酸(色谱纯):ROE SCIENTIFIC 公司生产; 其余试剂均为市售分析纯。
1.2 柴胡舒肝散药物代谢动力学的研究(2):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_205294.html