3. 实验方案与方法 14
3.1 四环素储备液的配置 14
3.2 铜绿微囊藻细胞数与吸光度的关系 14
3.2.1 实验原理 14
3.2.2 实验方法 15
3.3 铜绿微囊藻生长曲线及抑制率 15
3.4 铜绿微囊藻pH变化规律 16
3.5 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 16
3.5.1 实验原理 16
3.5.2 试剂配制 16
3.5.3 实验方法 16
3.6 高效液相色谱检测四环素在铜绿微囊藻液中的降解 17
3.6.1 实验原理 17
3.6.2 实验特点 17
3.6.3 实验方法 18
4. 结果与讨论 20
4.1 铜绿微囊藻细胞数与吸光度的关系 20
4.2 生长曲线与抑制率 20
4.3 铜绿微囊藻pH变化规律 25
4.4 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 26
4.5 高效液相色谱检测四环素在铜绿微囊藻液中的降解 28
4.5.1 标准曲线 28
4.5.2 降解曲线 31
5. 结论 37
1. 引言(绪论)
1.1 抗生素的污染现状
抗生素是一类生物(主要是真菌、放线菌或细菌等微生物)在其代谢过程中产生的具有杀灭或抑制他种生物(主要是微生物)作用的化学物质。除从微生物培养液提取外,有些抗生素已能通过人工合成或半合成得到。抗生素能在不同程度上起到抗菌、杀菌和抑菌作用,其作用机理主要包括:通过抑制细菌细胞壁的形成,使细菌因丧失细胞壁保护而死亡;影响胞浆膜通透性,使细菌屏障和运输物质功能受到障碍;影响蛋白质合成,使细菌生长受到抑制;影响核酸代谢,使细菌生长分裂受到抑制等等。
一般来说,抗生素包括人用和兽用两类。目前大部分医院对药物的使用仍以抗生素的处方为主,这就造成了医疗系统强加给生病病人抗生素的滥用;另有一些家庭自医的人群,随意到药店擅自购买抗生素服用。
抗生素在畜禽生产中的使用就更加令人担忧,常以高剂量使用治疗各种疾病,以低剂量使用促进畜禽生长和增产,因此其在畜禽生产中的使用量非常大。含有抗生素的畜禽粪便的土地利用是土壤中抗生素类污染物的主要来源。据报道, 在畜禽生产中使用的抗生素有 30%~90%以母体化合物形式随畜禽粪便排出,某些抗生素能以母体化合物形式排出高达95%[1、2]。因此对该问题更应引起重视。
北京大学临床药理研究所肖永红教授等专家调查推算,中国每年生产抗生素原料21万吨,有9.7万吨抗生素用于畜牧养殖业,占年总产量的46.1%。滥用抗生素使得抗生素以活性形式存在于污水中。超过90%的人类使用的抗生素以活性形式排出体外,这些抗生素接着出现在我们的饮用水中,不仅会进入人体干扰正常的菌群平衡,而且还可以通过杀灭周围环境中的有益菌来破坏生态平衡。同时,农业滥用抗生素正在导致超级病毒的传播,非传染性疾病和免疫性疾病大大增加了,人类的免疫系统正在衰退,而抗生素的滥用也是造成新型疾病增加的原因之一。
多方面的资料表明,现有水处理技术对污水中含有的相当一部分抗生素没有明显的去除效果如抗癫痫药卡马西平的去除率仅为8%,而降血脂药氯贝酸的去除率几乎为0,全部随污水处理厂出水进入受纳水体。因此,对于含有抗生素的医院污水或城市生活污水,无论是否经过处理,只要实施排放,均可以导致对地表水、地下水以及农田土壤环境的污染。 四环素对蓝藻的急性毒性研究+实验讨论(2):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_762.html