影响SBA-15结构的因素有很多，通过改变模板剂的化学结构、加入助溶剂、合成时硅源的选择等都获得不同形状的SBA-15介孔材料[16-18]。为了制备具有更高催化活性的SBA-15，可以通过表面修饰、掺杂等方法来引入活性基团使SBA-15改性，让其在大分子的吸附方面能被普遍使用。

1.4 不同添加剂的简介

不同的添加剂以及同一种添加剂不同浓度都会对固定化酶的酶活产生不同的影响，本课题研究的添加剂包括：蔗糖，牛血清蛋白(BSA)和明胶，探究哪种添加剂对固定化酶的效果最好。

1.4.1 蔗糖的简介

蔗糖是高等植物光合作用产生的，是植物生长和发育的结构和能源物质。蔗糖是葡萄糖和果糖积累的重要表达形式，它可以通过“碳”运输糖分[19]。另外，蔗糖还可以调节细胞代谢量，通过诱导基因使与光合作用相关的一些基因表达水平降低，抑制了其他基因的作用。蔗糖易溶于水，在热、酸性、碱性等条件下不稳定，溶解度随温度的上升而增大，它自身发生的化学反应会造成蔗糖量的损失以及其他物质的产生。

1.4.2 牛血清蛋白(BSA)的简介

牛血清白蛋白(BSA)是循环体系的运输蛋白，它分子量小，结构稳定，能结合多种内源和外源配体。牛血清蛋白分子可以与药物、代谢物和金属离子等通过化学反应结合，影响药物与分子结合后的吸收、运送、代谢及清除作用[20]。血液中的白蛋白主要起维持渗透压及物质交换作用、稳定血液pH值和充当载体作用，还能与药物、代谢物和金属离子等多种物质结合，直接影响药物的吸收、代谢及清除。BSA的储存温度应控制在2-8℃，一般作为稳定剂来保存修饰酶。BSA还能结合小分子的运载功能在血浆中起到解毒剂的作用，通过维持血液渗透压使其活性大幅度提高。

1.4.3 明胶的简介

明胶是胶原的变性产物，这种蛋白材料兼具酸性和碱性，通过胶原部分降解而使其带电量改变，具有很高的营养价值。明胶的分子结构虽然具有良好的吸水性，但它在冷水中难以溶解。明胶不易破坏生物组织，价格便宜且易于成膜，因此被广泛应用于食品、医药及化工产业。明胶还可以通过其乳化，粘合的作用改善糖果品质，但我们需要通过将其改性来提高它的耐水性[21]。

1.5 本课题研究内容与意义来,自|优;尔`论^文/网www.youerw.com

1.5.1 研究内容

本实验组通过戊二醛吸附交联法制备固定化酶，将乙酰胆碱酯酶作为酶源，SBA-15作为载体。通过优化酶的固定化条件，保证酶活部位不与载体结合，采取温和的方式来保护酶蛋白基团，获得酶损耗低，活力高的固定化酶。

本课题组探究了不同添加剂和热浴时间对固定化酶性质及酶活性的影响。在本实验中，我们研究的是0 mM，5 mM，10 mM，15 mM，20 mM，25 mM这六种浓度的戊二醛交联剂对制备固定化乙酰胆碱酯酶的效果，选择最适宜的反应条件，得出最佳的戊二醛交联浓度，使其在热浴后具有最高的热稳定性。另外，我们选择蔗糖，BSA和明胶这三种不同添加剂。研究不同添加剂各自在0%，0.1%，0.2%，0.3%，0.4%，0.5%这六个不同浓度对固定化乙酰胆碱酯酶性质的影响，建立其浓度与固定化酶剩余酶活之间的关系。然后，将酶活最高的几种浓度的添加剂相混合后，与这几种浓度的添加剂相对比，得出酶活率最高的添加剂类型。最后，将最佳添加下制备的固定化酶在4 oC，25 oC和50 oC这三个温度下分别热浴0h，2h，4h和6h，由此探究固定化酶的温度稳定性。