曾等[36]采用加速溶剂萃取(ASE)提取肉制品中硝酸根、亚硝酸根,并用梯度淋洗离子色谱法分离测定硝酸根和亚硝酸根。
1.4.1 比色法
比色法以有色化合物的显色反应为机理,通过比较(目视比色法)或测量(光电比色法)有色物质溶液颜色深度两种方法来得到待测组分含量。相比于荧光、发光、电化学等检测方法的耗时,复杂,比色法具有肉眼可见、无需复杂仪器测量、非常适合于现场测定和实时测定的优点[37],因此一直是分析化学领域里的热点研究方向。许宏岳,李爱红,胡明昌等人就用比色法测定血清亚硝酸盐和硝酸盐及初步临床应用,并取得一定成果。
上述两种方法的原理都是基于朗伯-比尔定律(A=εbc)。目视比色法即标准系列法,首先将不同体积的待测物标准溶液加入一组相同的比色管中,按实验步骤显色后,配成颜色渐变的标准色阶。其次待相同条件下试样溶液也显色后,与标准色阶作比较,目视出颜色最相近的标准溶液,根据其中所含标准溶液的量,计算试样中待测组分的含量。此方法很难消除主观误差,而另一种方法,光电比色法则可以。实验中利了用滤光片(optical filter),众所周知,干预因素愈少,制备过程快速准确。但是此实验方法在精确性,灵敏性,适用范围等有一定程度的缺陷。例如仪器中的光源和滤光片,仅能运用于可见光谱范围和获得一定波长的复合光,不是单色光。因此,逐渐被分光光度计替代。
1.4.2 荧光法
据苏等对于光度法检测亚硝酸根的研究[38]分为四类催化光度法。1978年R .Montes等[39]
第一种方法是催化光度法测定[40],此方法的优点在于灵敏,但存在发光体系单一性,稳定性较差, 选择性差,条件不易控制等问题,这就需要对操作人员技术有较高要求,且 Br -、I-、SCN- 等存在干扰。为了利于催化光度法的优化,可以从显色反应条件、终止反应的方法和消除干扰离子等着手改进 ,同时应从理论上进一步探讨NO2-的催化机理,使之成为一种具有灵敏度高,操作简单,选择性好的定向化学发光分析方法,为现场检测方法的不二选择。
第二种方法是流动注射分光光度法1994年A .Chaurasia等[41]将水样注入0.36 mmol/L HCl 的载流液中,与10~70 mg/L硝基苯胺流混合,在360 nm 处光度测定重氮化阳离子,测定亚硝酸根。另外几位科学家M.J.Ahmed 等[42]建立了流动注射分析分光光度法同时测定亚硝酸盐与硝酸盐。该方法适用肉制品、面粉、啤酒及干酪的分析。还有M.F.Mousavi 等科学家[43]将试样注入载流中并与含氯化钾的藏红盐酸试剂混合,反应后测定亚硝酸根。文献综述
荧光分光光度法测定NO2-是一种新兴的测定方法。该方法的优点是操作简单快速,灵敏度高,试剂使用便宜,选择性好。该方法的主要原理有三个: 首先是处在酸性条件下,利用亚硝酸根可以和荧光有机试剂反应造成的荧光消失的现象明显。冯等研究人员[44]研究出一种新的检测NO2-的荧光方法。选择吡咯Y,将其还原后,荧光猝灭,结果也可直接观察。适用于发电厂废水,井水等中的NO2-检测;其次同样是在酸环境下,NO2 - 氧化I-生成游离态碘,测定亚硝酸根的方法同上。朱等[45]选择KI与NO2-发生反应生成单质形态的碘。使异硫氰酸荧光素(5-FITC)的荧光消失,以此检测NO2-;最后是用分子荧光光谱法,在酸环境下,NO2 -通过用催化氧化剂来氧化荧光试剂,使荧光消失,进而测定NO2 -。而后有张等研究人员[46]就利用H3PO4,吡咯红β被溴酸钾氧化后荧光消失,据此检测NO2 -。
荧光光度法是新发展起来的测定方法,具有操作简便、反应快速灵敏、干扰少等优点。 金纳米棒-荧光染料-金纳米球的制备及其在亚硝酸盐检测中的应用研究(5):http://www.youerw.com/huaxue/lunwen_78411.html