This paper uses PCR technology to design according to the sequence of mouse genes primers used for genotyping, sampling, extraction DNA, PCR fragment, PCR analysis results, linking corresponding tissue and organ development stage, guide the transgenic mice as a tool used in conditional knockout rats, contribute to the study of pituitary development and motor neuron specialization。

Keyword: PCR increase； grown and development;   Genotype identification;  tdTomato

1 引言 1

1。1背景介绍 1

1。1。1神经元的相关简介 1

1。1。2垂体的相关简介 1

1。2 引物设计相关简介 2

1。3 Lhx4基因简介 3

1。4 tdTomato简介 4

1。5小鼠特性与实验源Q于W优H尔J论K文M网WwW.youeRw.com 原文+QQ75201.,8766 注意事项 5

1。5。1小鼠的特点 5

1。5。2生物学特性 5

1。5。3解剖学特性 5

1。5。4生理学特点 5

1。5。5饲养管理要求 5

2 实验材料与方法 6

2。1 实验材料 6

2。1。1 实验试剂 6

2。1。2 实验仪器 7

2。2 实验方法 8

2。2。1 样品采集 8

2。2。2小鼠DNA的提取 8

2。2。3 Thermo ND2000C测量DNA浓度 9

2。2。4引物设计 9

2。2。5聚合酶链式反应（PCR） 9

2。2。6 PCR反应体系 10

2。2。7琼脂糖凝胶电泳 11

3 实验结果 12

4 总  结 13

参考文献 14

致  谢 15

1 引言

1。1背景介绍

1。1。1神经元的相关简介

在发育期间运动神经元（MN）多样化为多种亚型，其专门用于运动控制特定组的骨骼肌或内脏器官。MN多样化取决于几种转录调节因子的协同作用，包括LIM基因家族，其对于MN存活和命运测定至关重要。

我们调查了Isl类LIM同源结构域蛋白在运动神经元多样化使用小鼠遗传方法的作用。缺乏Isl2功能的小鼠胚胎显示缺陷的胸部水平运动神经元的迁移和轴突投影，似乎反映从内脏到体细胞运动神经元特性的细胞自主转换。论文网

1。1。2垂体的相关简介

   下丘脑 - 垂体 -正常（HPG）轴是生殖功能的最关键的调节剂。在发育期间遗传或环境对HPG轴的损害可以持续到成年，并且诸如性腺激素合成，青春期的时间和生育力的过程可以受到影响。在下丘脑的水平，多个区域在不同的时间发展并且在它们的图案化和成熟所需的信号传导途径和转录因子的音乐会的控制下

   垂体器官发生是一个高度复杂和严格管制的过程，取决于几个转录因子（TF），如PROP1，HESX1，LHX3和LHX4。正常的垂体发育需要TF的时间和空间组织的表达和不同TF，DNA和TF共激活剂之间的相互作用。这些基因中的突变导致不同的垂体功能障碍的组合，其可以与中枢神经系统的结构改变相关联，导致先天性全身垂体功能障碍。文献综述 lhx4-tdtomato小鼠的基因分析(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_196614.html