1。3。2 愈伤组织

愈伤组织，大多划分为三种类型：Ⅰ型、Ⅱ型和III型，Ⅰ型愈伤组织为绿色或乳白色，结构致密，生长缓慢，很难长期保持胚性[8]；Ⅱ型愈伤组织呈黄色或淡黄色，结构松软，为颗粒状，生长较快为胚性愈伤组织，可长时间保持胚性，有较高的胚状体分化率；III型愈伤组织为灰色透明或白色，呈水渍状，生长较快不宜长期继代培养，极容易发生褐化直至死亡[9]。前两种为胚性愈伤组织。Ⅰ型愈伤组织极易分化成器官，但不适合继代培养。III型愈伤组织为非胚性愈伤组织，很难分化为器官。玉米遗传转化实验中最常用的受体为Ⅱ型愈伤组织。

考虑到玉米不同的基因型，形成胚性愈伤组织的能力也有所区别。经总结：与悬浮细胞和原生质体相比，胚性愈伤组织较容易诱导，且转化周期短，再生能力强。而目前，胚性愈伤组织的诱导大多数时候使用幼胚。

1。4  抗除草剂基因研究进展

致使玉米减产的重要因素之一是杂草。世界上大部分农业种植区面临杂草问题时大多使用化学除草机。随生物技术在不断地发展，培育带有抗性的植物周期不断减短，而研究新型除草剂的费用相对花费较多，所以，各国科学家、种子公司和农药公司都在加紧研究如何有效利用当代转基因技术培育出抗除草剂的玉米新品种。

本实验所研究的转基因玉米主要是针对抗草甘膦这一除草剂基因的。草甘膦作用机理：通过抑制在芳香类氨基酸合成中起关键作用的EPSPS活性。每当植物吸收草甘膦时，具有活性的EPSPS合成酶将会严重短缺，就让苯草酸不能及时形成芳香氨基酸并且大量积累苯草酸，由此致使芳香氨基酸缺乏，最终导致植株死亡。研究人员通过将抗除草基因如草甘膦氧化还原基因(gox基因)等转入植物中，逐步形成除草剂的标靶酶，使植株吸收草甘膦之后，仍具备正常的代谢功能，从而成为转基因植株。

1。5  玉米愈伤组织培养和诱导文献综述

玉米细胞和组织的培养主要使用N6和MS培养基，两者针对不同品系和品种的玉米愈伤组织，对植株再生有不同的影响。如果是为了长出胚性愈伤组织，MS的效果比N6好；若是由幼胚直接再生植株，则MS的效果就不如N6了。两个培养基的区别在于其成分中氮源浓度不同[10]。浓度较高的2,4—D仅能诱导外植体进行脱分化而后产生愈伤组织，降低或不添加2,4—D则能使愈伤组织分化出完整的胚状体，直至再生出小植株。

1。6  农杆菌介导的遗传转化

农杆菌介导的遗传转化是利用农杆菌Ti质粒系统将外援DNA导入植物受体细胞中。这种转化方法具有易操作、低费用、高转化频率和拷贝数少等等优势，农杆菌转化法也一直是进行双子叶植物遗传转化的最佳方法。对于单子叶植物的遗传转化，近几年来，使用农杆菌进行转化也逐渐取得成果，尤其是禾谷类植物。

Micheal等[11]使用携带病毒的农杆菌感染了玉米幼胚，得出了只有通过农杆菌介导，病毒才能进入细胞进行复制的结果。Gould等[12]使用带有nptll基因和gus基因的农杆菌介导并转化玉米品种为Funk’sG90的芽尖，得到的转基因再生植株以及子代基因中都检测到了标记基因。