在整个土壤采集过程中，采用三点取样法。每个小区选取间距为一米辣椒植株三株，先将植株拔出，轻轻抖动以除去粘附的大量土壤，再利用毛刷轻轻刷下紧贴在辣椒根部的根围土，三株辣椒样品混合在一起，装入塑封袋放在冰盒中带回实验室，样品前期处理后研磨过2 mm筛。进行土壤总DNA 的提取、进行PCR-DGGE分析，部分置于阴凉通风处自然干燥至恒重，用作土壤酶活性检测。剩余的则置于-20 ℃冰箱保存备用。

2。2土壤酶活性测定

土壤酶活性测定，包括脲酶、磷酸酶、蔗糖酶和过氧化氢酶以及纤维素酶。（具体过程参照关松荫等[13]）

2。2。1 脲酶活性测定

采取苯酚钠-次氯酸钠比色法。细菌和真菌以及高等植物里普遍存在着脲酶。脲酶具有极为专性的酰胺酶作用，它只能够水解尿素，并且水解的最终产物是NH3、CO2和H2O。土壤中脲酶的活性与土壤中微生物的数量、有机物质的含量和全氮的含量以及速效磷的含量呈正相关。一般根际土壤脲酶活性较高，并且中性土壤的脲酶活性一般大于碱性土壤的脲酶活性。因此，通过测定脲酶的活性来表征土壤中的氮素状况。

土壤脲酶活性测定一般以脲素作为基质经过酶促反应之后，通过测定此过程中生成的氨量得出，或者通过测定未水解的尿素的量来得出。本次实验采用以尿素作为基质，依据酶促产物氨同苯酚-次氯酸钠反应后生成蓝色的靛酚的方法来测定土壤脲酶的活性。文献综述

称量5 g辣椒土样，置于50 ml三角瓶中，加入甲苯1 ml，振荡混匀，待15 min后加入10% 尿素溶液10 ml 和 PH 6。7柠檬酸盐缓冲液20 ml，混匀后放入恒温箱，在37 ℃下培养24小时。到时取出，过滤，吸取滤液1 ml加入到50 ml容量瓶中，再加入苯酚钠溶液4 ml和次氯酸钠溶液3 ml，注意随加随摇匀。待20 min后显色，进行定容。最后于1 h内使用分光光度计578 nm下处进行比色。（在1 h内，靛酚的蓝色保持稳定）。

2。2。2磷酸酶活性测定

采取磷酸苯二钠法。土壤中磷酸酶的测定主要是依据酶促反应后生成的有机基团含量或者无机磷含量，然后计算得出土壤磷酸酶的活性的方法。前一种方法通常被称为有机基团含量法，这是目前较为常用的测定土壤中磷酸酶活性的方法，后一种方法被称为无机磷含量法。研究表明：磷酸酶具有三种最适的pH值范围：4~5、6~7、8~10。所以，测定酸性土壤的磷酸酶、中性土壤的磷酸酶和碱性土壤的磷酸酶，都要提供相应的合适的pH缓冲液才能测得该土壤中磷酸酶的最大活性。测定土壤磷酸酶活性采用的pH缓冲体系一般有乙酸盐缓冲溶液（pH 5。0~5。4）、柠檬酸盐缓冲溶液（pH 7。0）和三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液（pH 7。0~8。5）以及硼酸缓冲溶液（pH 9~10）。土壤磷酸酶测定时的常用基质为：磷酸苯二钠、酚酞磷酸钠和甘油磷酸钠以及α-或者β-萘酚磷酸钠。

称取5 g土壤样品，加到200 ml三角瓶中，加入甲苯2。5 ml，轻轻摇晃15 min，加入0。5%磷酸苯二钠20 ml （酸性土壤磷酸酶用乙酸盐缓冲液；中性土壤磷酸酶用柠檬酸盐缓冲液；碱性土壤磷酸酶用硼酸盐缓冲液），混匀后置入恒温箱，在37 ℃下培养24 小时。培养结束后取出，加入 0。3%硫酸铝溶液100 ml后过滤。吸取滤液3 ml，加到50 ml容量瓶中，加入硼酸缓冲液5 ml和氯代二溴对苯醌亚胺试剂4滴，显色后定容，静置30 min后，使用分光光度计于660 nm处进行比色。