摘要：本研究从菊花中克隆了CmHSF4A基因，分析其表达特性，并对超表达CmHSF4A的转基因株系进行耐盐性鉴定和生理指标的检测，研究结果如下：同源克隆CmHSF4A基因，开放阅读框（ORF）1077bp，CmHSF4A受盐胁迫的明显诱导，表现出组织特异性；对CmHSF4A超表达转基因菊花的耐盐性鉴定发现，两个转基因菊花株系较对照耐盐性明显提高。H2O2及O2∙-含量测定及活性氧清除酶酶活测定发现，转基因菊花的活性氧含量低于野生型，相应的，其清除酶酶活性高于野生型，表明CmHSF4A转基因菊花有较强的活性氧清除能力，推测CmHSF4A可通过促进转基因植株活性氧清除能力的提高，从而增强植物的耐盐性。28056
毕业论文关键词：菊花；热激转录因子；CmHSF4A；耐盐性
Cloning and Functional Analysis of CmHSF4A Gene in Chrysanthemum
Abstract: In this study, we isolated CmHSF4A from chrysanthemum and analysed their expression feature, salt tolerance and physiological index of transgenic lines were also tested. The main content and conclusions are as follows:CmHSF4A was cloned from chrysanthemum with the method of homologous cloning. The ORF of CmHSF4A was 1242bp contained a 1077 bp open reading frame (ORF). Additionally, the transgenic plants reduced H2O2 and O2∙- accumulation under salinity, which could be due to up-regulation of ROS-scavenger activities such as SOD, APX and CAT, Together, these results suggest that CmHSF4A conferred salinity tolerance in chrysanthemum as a consequence of Na+/K+ ion and ROS homeostasis.
Key words: Chrysanthemum morifolium; Heat shock transcription factor; CmHSF4A; salinity;
目 录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引 言 1
1 材料与方法 2
1.1 植物材料、表达载体与菌株 2
1.2 CmHSF4A基因克隆 2
1.2.1 RNA提取 3
1.2.2 去基因组DNA及第一链cDNA合成 3
1.3 CmHSF4A基因的表达特性分析 4
1.4 CmHSF4A转基因菊花耐盐性鉴定及耐盐机理 5
1.4.1 转基因植株的盐处理及耐盐性鉴定 5
1.4.2 转基因植株盐胁迫下生理指标的检测 5
1.5 数据分析 5
2 结果与分析 5
2.1 CmHSF4A基因克隆 5
2.2 CmHSF4A表达特性 5
2.2.1 不同组织器官中CmHSF4A的表达特性 5
2.2.2 盐胁迫下CmHSF4A的表达分析 6
2.3 CmHSF4A转基因菊花耐盐性鉴定及耐盐机理 6
2.3.1 转基因植株盐胁迫下存活率分析 6
2.3.2 转基因植株盐胁迫下活性氧水平及其清除酶活性 7
3 讨论 7
3.1 CmHSF4A序列特征及耐盐性功能 7
3.2 CmHSF4A通过减少活性氧累积及增加活性氧清除能力提高耐盐性 8
致谢 8
参考文献 9
菊花热激转录因子CmHSF4A基因的克隆及其功能鉴定
引言：
菊花(Chrysanthum morifolium)为菊科菊属草本观赏植物，原产自我国，已有三千多年的栽培历史[1]。是我国十大名花和世界四大切花之一，其切花消费量在全球仅次于月季。我国从上世纪八十年代就开始了切花菊的生产，目前切花菊已成为高效农业行业的一员。经过多年的实践研究，我国切花菊产业发展迅速，已达到周年供应的水平[2]。但不少菊花品种对高盐环境缺乏耐性，其在我国沿海及北方的干旱和半干旱地区等盐渍化严重地区的栽培和应用受到很大限制，此外，在切花菊集约化设施生产中，土壤盐渍化或次生盐渍化会造成植物萎蔫、黄化甚至死亡[3]。菊花产量和品质受到严重影响，经济损失很大。但是，对于盐渍化土壤的改良由于受到自然因素、资金条件的严重限制，效果不明显，且适用范围很有限[3]，因此，培育具有优良抗性性状的菊花新品种是菊花现代育种的重要目标。 菊花热激转录因子CmHSF4A基因的克隆及其功能鉴定:http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_22766.html