1.3分子标记分析
1.3.1 DNA的提取
采用CTAB法,主要步骤参考文献[8]:
1.3.2 PCR扩增
PCR扩增体系(10 µL)包括模板DNA 1.5 µL (30 ng/µL);Primers 0.5 µL (10 µmol•L-1);10 × easy Taq buffer (Mg2+ ) 1.5 µL;dNTP 0.4 µL (2.5 mmol•L-1);Taqase 0.1 µL (5 UµL-1);加ddH2O至10 µL。
PCR反应程序:94℃预变性 3 min;94 ℃ 30 s,退火温度根据引物调整,45 s,72 ℃ 1 min 10 s,33个循环;72 ℃ 10 min;然后4 ℃保存。 百萨偃麦草染色体5J特异标记的开发与应用(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_33099.html